中华肿瘤杂志
中華腫瘤雜誌
중화종류잡지
CHINESE JOURNAL OF ONCOLOGY
2012年
12期
894-898
,共5页
韩香萍%施桂兰%王成锋%李洁%张建伟%张郁%张叔人%刘滨磊
韓香萍%施桂蘭%王成鋒%李潔%張建偉%張鬱%張叔人%劉濱磊
한향평%시계란%왕성봉%리길%장건위%장욱%장숙인%류빈뢰
单纯疱疹病毒属%绿色荧光蛋白质类%诊断试验,常规%循环肿瘤细胞
單純皰疹病毒屬%綠色熒光蛋白質類%診斷試驗,常規%循環腫瘤細胞
단순포진병독속%록색형광단백질류%진단시험,상규%순배종류세포
Simplexvirus%Green fluorescent proteins%Diagnositic tests,routine%Circulating tumor cells
目的 以表达绿色荧光蛋白(GFP)的单纯疱疹病毒(HSVGFP)建立一种快速检测循环肿瘤细胞(CTCs)的方法,并与常规细胞学检测方法的检测结果进行比较.方法 将HSVGFP与7个不同的肿瘤细胞系共培养,用荧光显微镜观察表达荧光的细胞.将10、100、1000和10000个人肺癌PG细胞加入到2ml全血中,以淋巴细胞分离液清除红细胞,同时富集肿瘤细胞.以HSVGFP感染收集到的细胞,用荧光显微镜确定荧光细胞数量,分析HSVGFP检测方法的敏感性.以HSVGFP法检测70例肿瘤患者临床样本中的CSCs,并与其中15例有细胞学报告者的检测结果进行比较.结果 HSVGFP感染的7个肿瘤细胞系均表达绿色荧光.应用HSVGFP检测方法,可以在仅加入了10个肿瘤细胞的2 ml全血中检测出阳性结果.对70例临床样本采用HSVGFP法进行检测的结果显示,有40例样本呈阳性反应.在15例有细胞学检测结果的临床样本中,细胞学检测阳性仅有4例,而HSVGFP方法检测阳性有11例;其中细胞学检测阳性的4例样本,HSVGFP检测均为阳性.结论 以HSVGFP检测患者体内CTCs的方法简便,且具有较高的敏感性.
目的 以錶達綠色熒光蛋白(GFP)的單純皰疹病毒(HSVGFP)建立一種快速檢測循環腫瘤細胞(CTCs)的方法,併與常規細胞學檢測方法的檢測結果進行比較.方法 將HSVGFP與7箇不同的腫瘤細胞繫共培養,用熒光顯微鏡觀察錶達熒光的細胞.將10、100、1000和10000箇人肺癌PG細胞加入到2ml全血中,以淋巴細胞分離液清除紅細胞,同時富集腫瘤細胞.以HSVGFP感染收集到的細胞,用熒光顯微鏡確定熒光細胞數量,分析HSVGFP檢測方法的敏感性.以HSVGFP法檢測70例腫瘤患者臨床樣本中的CSCs,併與其中15例有細胞學報告者的檢測結果進行比較.結果 HSVGFP感染的7箇腫瘤細胞繫均錶達綠色熒光.應用HSVGFP檢測方法,可以在僅加入瞭10箇腫瘤細胞的2 ml全血中檢測齣暘性結果.對70例臨床樣本採用HSVGFP法進行檢測的結果顯示,有40例樣本呈暘性反應.在15例有細胞學檢測結果的臨床樣本中,細胞學檢測暘性僅有4例,而HSVGFP方法檢測暘性有11例;其中細胞學檢測暘性的4例樣本,HSVGFP檢測均為暘性.結論 以HSVGFP檢測患者體內CTCs的方法簡便,且具有較高的敏感性.
목적 이표체록색형광단백(GFP)적단순포진병독(HSVGFP)건립일충쾌속검측순배종류세포(CTCs)적방법,병여상규세포학검측방법적검측결과진행비교.방법 장HSVGFP여7개불동적종류세포계공배양,용형광현미경관찰표체형광적세포.장10、100、1000화10000개인폐암PG세포가입도2ml전혈중,이림파세포분리액청제홍세포,동시부집종류세포.이HSVGFP감염수집도적세포,용형광현미경학정형광세포수량,분석HSVGFP검측방법적민감성.이HSVGFP법검측70례종류환자림상양본중적CSCs,병여기중15례유세포학보고자적검측결과진행비교.결과 HSVGFP감염적7개종류세포계균표체록색형광.응용HSVGFP검측방법,가이재부가입료10개종류세포적2 ml전혈중검측출양성결과.대70례림상양본채용HSVGFP법진행검측적결과현시,유40례양본정양성반응.재15례유세포학검측결과적림상양본중,세포학검측양성부유4례,이HSVGFP방법검측양성유11례;기중세포학검측양성적4례양본,HSVGFP검측균위양성.결론 이HSVGFP검측환자체내CTCs적방법간편,차구유교고적민감성.
Objective To develop a novel rapid protocol for the detection of occult disseminated tumor cells by a recombinant herpes simplex virus expressing GFP (HSVGFP).Methods Tumor cells of seven cell lines were exposed to HSVGFP and then examined for GFP expression by fluorescence microscopy.Various numbers of tumor cells (10,100,1000,10 000) were mixed into 2 ml human whole blood,separated with lymphocytes separation medium,exposed to HSVGFP,incubated at 37℃ for 6-24 h and then counted for the number of green cells under the fluorescence microscope.Some clinical samples including peripheral blood,pleural effusion,ascites,spinal fluid from tumor-bearing patients were screened using this protocol in parallel with routine cytological examination.Results HSVGFP was able to infect all 7 tumor cell lines indicating that the HSVGFP can be used to detect different types of tumor cells.The detection sensitivity was 10 cancer cells in 2 ml whole blood.In the clinical samples,there were 4/15 positive by routine cytological examination but 11/15 positive by HSVGFP,indicating a higher sensitivity of this new protocol.Conclusion Recombinant herpes simplex virus-mediated green fluorescence is a simple and sensitive technique for the identification of occult disseminated cancer cells including circulating tumor cells (CTCs).
