国际移植与血液净化杂志
國際移植與血液淨化雜誌
국제이식여혈액정화잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF TRANSPLANTATION AND HEMOPURIFICATION
2014年
2期
31-34
,共4页
张丽红%袁瑾%周韵娇%牛建英
張麗紅%袁瑾%週韻嬌%牛建英
장려홍%원근%주운교%우건영
慢性肾脏疾病%γ干扰素%白细胞介素4
慢性腎髒疾病%γ榦擾素%白細胞介素4
만성신장질병%γ간우소%백세포개소4
Chronic kidney disease%Interferon-γ%Interleukin-4
目的 通过观察慢性肾脏疾病患者外周血淋巴细胞细胞因子γ干扰素、白细胞介素4 mRNA合成及蛋白分泌水平,探讨慢性肾功能衰竭时免疫功能紊乱的发生机制.方法 入选慢性肾功能不全患者18例(慢性肾脏疾病3、4、5期各6例)和健康对照者4名,于肘静脉采血10ml,采用含有15％小牛血清(56℃水浴中灭活30 min)的RPMI 1640液培养淋巴细胞,应用TRIzon法提取总RNA,以RT-PCR法对γ干扰素和白细胞介素4mRNA进行扩增,琼脂糖凝胶进行电泳分离,双抗体夹心法检测γ干扰素和白细胞介素4蛋白浓度.结果 慢性肾脏疾病4、5期者外周血淋巴细胞培养上清液中γ干扰素浓度低于健康对照者和慢性肾脏疾病3期者,健康对照组、慢性肾脏疾病3、4、5期患者白细胞介素4浓度差异无统计学意义,慢性肾脏疾病4期者γ干扰素/白细胞介素4比值最低;慢性肾脏疾病4、5期者γ干扰素mRNA的相对积分光密度低于健康对照组和慢性肾脏疾病3期者,慢性肾脏疾病5期者白细胞介素4 mRNA的积分光密度值高于健康对照组和慢性肾脏疾病3、4期者,慢性肾脏疾病4、5期者γ干扰素与白细胞介素4mRNA积分光密度的比值低于健康对照组和慢性肾脏疾病3期者.结论 慢性肾脏疾病患者确实存在T淋巴细胞功能异常.随着慢性肾脏疾病的进展,T淋巴细胞分泌细胞因子的功能呈下降趋势.在慢性肾脏疾病的发生和发展中,Th1/Th2平衡存在向TH2偏移的趋势.
目的 通過觀察慢性腎髒疾病患者外週血淋巴細胞細胞因子γ榦擾素、白細胞介素4 mRNA閤成及蛋白分泌水平,探討慢性腎功能衰竭時免疫功能紊亂的髮生機製.方法 入選慢性腎功能不全患者18例(慢性腎髒疾病3、4、5期各6例)和健康對照者4名,于肘靜脈採血10ml,採用含有15％小牛血清(56℃水浴中滅活30 min)的RPMI 1640液培養淋巴細胞,應用TRIzon法提取總RNA,以RT-PCR法對γ榦擾素和白細胞介素4mRNA進行擴增,瓊脂糖凝膠進行電泳分離,雙抗體夾心法檢測γ榦擾素和白細胞介素4蛋白濃度.結果 慢性腎髒疾病4、5期者外週血淋巴細胞培養上清液中γ榦擾素濃度低于健康對照者和慢性腎髒疾病3期者,健康對照組、慢性腎髒疾病3、4、5期患者白細胞介素4濃度差異無統計學意義,慢性腎髒疾病4期者γ榦擾素/白細胞介素4比值最低;慢性腎髒疾病4、5期者γ榦擾素mRNA的相對積分光密度低于健康對照組和慢性腎髒疾病3期者,慢性腎髒疾病5期者白細胞介素4 mRNA的積分光密度值高于健康對照組和慢性腎髒疾病3、4期者,慢性腎髒疾病4、5期者γ榦擾素與白細胞介素4mRNA積分光密度的比值低于健康對照組和慢性腎髒疾病3期者.結論 慢性腎髒疾病患者確實存在T淋巴細胞功能異常.隨著慢性腎髒疾病的進展,T淋巴細胞分泌細胞因子的功能呈下降趨勢.在慢性腎髒疾病的髮生和髮展中,Th1/Th2平衡存在嚮TH2偏移的趨勢.
목적 통과관찰만성신장질병환자외주혈림파세포세포인자γ간우소、백세포개소4 mRNA합성급단백분비수평,탐토만성신공능쇠갈시면역공능문란적발생궤제.방법 입선만성신공능불전환자18례(만성신장질병3、4、5기각6례)화건강대조자4명,우주정맥채혈10ml,채용함유15％소우혈청(56℃수욕중멸활30 min)적RPMI 1640액배양림파세포,응용TRIzon법제취총RNA,이RT-PCR법대γ간우소화백세포개소4mRNA진행확증,경지당응효진행전영분리,쌍항체협심법검측γ간우소화백세포개소4단백농도.결과 만성신장질병4、5기자외주혈림파세포배양상청액중γ간우소농도저우건강대조자화만성신장질병3기자,건강대조조、만성신장질병3、4、5기환자백세포개소4농도차이무통계학의의,만성신장질병4기자γ간우소/백세포개소4비치최저;만성신장질병4、5기자γ간우소mRNA적상대적분광밀도저우건강대조조화만성신장질병3기자,만성신장질병5기자백세포개소4 mRNA적적분광밀도치고우건강대조조화만성신장질병3、4기자,만성신장질병4、5기자γ간우소여백세포개소4mRNA적분광밀도적비치저우건강대조조화만성신장질병3기자.결론 만성신장질병환자학실존재T림파세포공능이상.수착만성신장질병적진전,T림파세포분비세포인자적공능정하강추세.재만성신장질병적발생화발전중,Th1/Th2평형존재향TH2편이적추세.
Objective To investigate gene expression and functional change of interferon-γ(IFN-γ)/interleukin-4 (IL-4) in patients with different stage of chronic kidney disease (CKD).Methods Eighteen patients with chronic renal failure (CRF) and 4 healthy controls were enrolled in this study.RPMI 1640containing 15％ fetal calf serum (56 ℃ water bath for 30 minutes) was used for lymphocyte culture.Total RNA was extracted by using TRIzon method,and RT-PCR was conducted for IFN-γ and IL-4 mRNA amplification.Double antibody sandwich was used to detect IFN-γand IL-4 protein.Results Concentration of IFN-γand IL-4 in the supematants of peripheral blood lymphocytes was higher in CKD 4 and 5 patients than in CKD 3 or healthy controls.Moreover,lower relative IOD value of IFN-γ mRNA was found in CKD 4 or 5 patients.In comparison with healthy controls and CKD 3 or 4 subjects,those of CKD 5 bad higher relative IOD value of IL-4 mRNA.IODIL-4 mRNA/IODIFN-γmRNA was increased in CKD 4 and 5 individuals.Conclusion Our investigation confirm abnormal T cell function in CKD patients,and T cell cytokine secretion function show a downward trend as CKD progress.
