CAJ | 학술논문

目的观察多西他赛对兔角膜碱烧伤新生血管化及角膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth facor VEGF)的表达影响,评价多西他赛对兔碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用并初步探讨其作用机制,为该药的临床应用提供实验依据,从而为药物治疗角膜新生血管提供一条新途径.方法健康新西兰白兔24只(南昌大学实验动物科学部提供),体质量1.5～2.0kg,雌雄兼有,双眼均为实验眼.动物实验遵循国家科学技术委员会颁布的《实验动物管理条例》,碱烧伤后随机将24只兔分为对照组和3个实验组,选择A、B、C组多西他赛滴眼液浓度分别为10μg·ml-1、20 μg·ml-1、40μg·ml-1,每组6只12眼,对照组D组滴NS眼液每日3次作为阴性对照,共观察14 d.所有动物均于碱烧伤后24 h开始,每日4次给予氧氟沙星滴眼液点眼预防感染,连点三日.应用显微镜,角膜照相观察并测量笫3,7,14 d各组CNV 长度,利用图象分析系统计算各组CNV的面积.取角膜组织行病理检查、免疫组织化学半定量观察及反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测VEGF及VEGF mRNA(Messenger RNA,信使核糖核酸)表达等方法,研究角膜新生血管的形成及抑制情况.结果 (1)裂隙灯显微镜观察结果:治疗组A、B、C 组CNV 生长明显受抑制,与对照组比较,新生血管发生时间较迟、生长缓慢、新生血管化面积小,治疗组B、C组兔角膜新生血管面积低于治疗组A和对照组,差异显著有统计学意义(P＜0.05),B、C 组间差异无统计学意义(P＞0.05).(2)免疫组化染色显示治疗组B、C组VEGF的表达较治疗组A和对照组明显减少,RT-PCR 在造模后各时间点角膜组织中VEGF mRNA的相对表达量,治疗组B、C组低于治疗组A和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论多西他赛滴眼液可有效抑制碱烧伤兔角膜新生血管的增殖,并可减少角膜组织VEGF的表达,抑制作用具有浓度相关性. 目的觀察多西他賽對兔角膜堿燒傷新生血管化及角膜組織中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth facor VEGF)的錶達影響,評價多西他賽對兔堿燒傷後角膜新生血管的抑製作用併初步探討其作用機製,為該藥的臨床應用提供實驗依據,從而為藥物治療角膜新生血管提供一條新途徑.方法健康新西蘭白兔24隻(南昌大學實驗動物科學部提供),體質量1.5～2.0kg,雌雄兼有,雙眼均為實驗眼.動物實驗遵循國傢科學技術委員會頒佈的《實驗動物管理條例》,堿燒傷後隨機將24隻兔分為對照組和3箇實驗組,選擇A、B、C組多西他賽滴眼液濃度分彆為10μg·ml-1、20 μg·ml-1、40μg·ml-1,每組6隻12眼,對照組D組滴NS眼液每日3次作為陰性對照,共觀察14 d.所有動物均于堿燒傷後24 h開始,每日4次給予氧氟沙星滴眼液點眼預防感染,連點三日.應用顯微鏡,角膜照相觀察併測量笫3,7,14 d各組CNV 長度,利用圖象分析繫統計算各組CNV的麵積.取角膜組織行病理檢查、免疫組織化學半定量觀察及反轉錄酶-聚閤酶鏈鎖反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測VEGF及VEGF mRNA(Messenger RNA,信使覈糖覈痠)錶達等方法,研究角膜新生血管的形成及抑製情況.結果 (1)裂隙燈顯微鏡觀察結果:治療組A、B、C 組CNV 生長明顯受抑製,與對照組比較,新生血管髮生時間較遲、生長緩慢、新生血管化麵積小,治療組B、C組兔角膜新生血管麵積低于治療組A和對照組,差異顯著有統計學意義(P＜0.05),B、C 組間差異無統計學意義(P＞0.05).(2)免疫組化染色顯示治療組B、C組VEGF的錶達較治療組A和對照組明顯減少,RT-PCR 在造模後各時間點角膜組織中VEGF mRNA的相對錶達量,治療組B、C組低于治療組A和對照組,差異有統計學意義(P＜0.05).結論多西他賽滴眼液可有效抑製堿燒傷兔角膜新生血管的增殖,併可減少角膜組織VEGF的錶達,抑製作用具有濃度相關性.
목적 관찰다서타새대토각막감소상신생혈관화급각막조직중혈관내피생장인자(vascular endothelial growth facor VEGF)적표체영향,평개다서타새대토감소상후각막신생혈관적억제작용병초보탐토기작용궤제,위해약적림상응용제공실험의거,종이위약물치료각막신생혈관제공일조신도경.방법 건강신서란백토24지(남창대학실험동물과학부제공),체질량1.5～2.0kg,자웅겸유,쌍안균위실험안.동물실험준순국가과학기술위원회반포적《실험동물관리조례》,감소상후수궤장24지토분위대조조화3개실험조,선택A、B、C조다서타새적안액농도분별위10μg·ml-1、20 μg·ml-1、40μg·ml-1,매조6지12안,대조조D조적NS안액매일3차작위음성대조,공관찰14 d.소유동물균우감소상후24 h개시,매일4차급여양불사성적안액점안예방감염,련점삼일.응용현미경,각막조상관찰병측량자3,7,14 d각조CNV 장도,이용도상분석계통계산각조CNV적면적.취각막조직행병리검사、면역조직화학반정량관찰급반전록매-취합매련쇄반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)검측VEGF급VEGF mRNA(Messenger RNA,신사핵당핵산)표체등방법,연구각막신생혈관적형성급억제정황.결과 (1)렬극등현미경관찰결과:치료조A、B、C 조CNV 생장명현수억제,여대조조비교,신생혈관발생시간교지、생장완만、신생혈관화면적소,치료조B、C조토각막신생혈관면적저우치료조A화대조조,차이현저유통계학의의(P＜0.05),B、C 조간차이무통계학의의(P＞0.05).(2)면역조화염색현시치료조B、C조VEGF적표체교치료조A화대조조명현감소,RT-PCR 재조모후각시간점각막조직중VEGF mRNA적상대표체량,치료조B、C조저우치료조A화대조조,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 다서타새적안액가유효억제감소상토각막신생혈관적증식,병가감소각막조직VEGF적표체,억제작용구유농도상관성.
Objective To evaluate the effect of Docetaxel eye drops on cornea neovascularization of rabbit induced by alkali cauterization.Methods Cornea neovascularization (CNV) was induced by 1 mol·l-1 NaOH in 24 rabbits.The rabbits were then divided into four groups,group A:10μg·ml-1 Docetaxel treated group (n=6),group B:20μg·ml-1 Docetaxel treated group (n=6),group C:40μg·ml-1 Docetaxel treated group (n=6),group D:control group (n=6),group A,B and C had been given the eye drops since the 2 days after alkali injury.The eyes in each group were examined by microscope at 3,7,14 days.The area of CNV was marked by photography.Immunohisto-chemistry and RT-PCR were used to determine the VEGF level.Results Docetaxel eye drops both inhibited the length and area of rabbit corneal neovascularization at different concentration.However,there was a little difference between the three concentrations of Docetaxel eye drops.The expression of VEGF was suppressed significantly in Docetaxel eye drops group,nevertheless the expression of VEGF was markedly increased in the control group.Conclusions Docetaxel is effective in the inhibition of corneal neovacularization induced by alkaline burn.