中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2014年
6期
430-433
,共4页
王慧%任嫱%陈卫刚%李睿%宋丽秀%张宁%齐翠花%郑勇
王慧%任嬙%陳衛剛%李睿%宋麗秀%張寧%齊翠花%鄭勇
왕혜%임장%진위강%리예%송려수%장저%제취화%정용
硫化氢%肝星状细胞%胶原蛋白
硫化氫%肝星狀細胞%膠原蛋白
류화경%간성상세포%효원단백
Hydrogen sulfide%Hepatic stellate cells%Collagen
目的 观察PI3K/Akt信号转导通路在硫化氢影响肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达中的作用.方法 体外培养大鼠肝星状细胞-T6,通过外源性硫化氢预处理体外培养的肝星状细胞,同时给予PI3K/Akt信号转导通路的特异性阻断剂LY294002,RT-PCR测定肝星状细胞的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达,Western blot法检测PI3K/Akt信号转导通路上游蛋白PI3K、p-Akt的表达情况.用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析,多个样本均数间的多重比较采用LSD-t检验分析数据.结果 正常对照组(N组)、二甲基亚砜溶质组(D组)、硫化氢组(S组)、LY294002抑制剂组(LY组)、LY拮抗硫化氢组(LY+S组)Ⅰ型胶原蛋白mRNA的灰度值分别为0.950±0.201、0.970±0.205、1.270±0.213、0.680±0.161、0.420±0.154,Ⅲ型胶原蛋白mRNA的灰度值分别为0.740±0.164、0.730±0.177、1.040±0.215、0.510±0.133、0.290±0.101,与正常对照组相比,单独给予硫化氢组肝星状细胞的Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达增强(F=14.635,P＜0.05),Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达增强(F=14.620,P＜ 0.05),与硫化氢组相比,同时给予硫化氢和LY294002组肝星状细胞的Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达减弱(F=14.635,P＜ 0.05),Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达减弱(F=14.620,P＜0.05).N组、D组、S组、LY组、LY+S组PI3K蛋白的灰度值分别为0.150±0.019、0.170±0.019、0.240±0.027、0.110±0.024、0,060±0.020,p-Akt蛋白的灰度值分别为1.020±0.097、0.940±0.153、1.330±0.236、0.610±0.055、0.330±0.043,与正常对照组相比,单独给予硫化氢组肝星状细胞的PI3K蛋白的表达增强(F=26.672,P＜0.05),p-Akt蛋白的表达增强(F=23.522,P＜0.05),与硫化氢组相比,同时给予硫化氢和LY294002组肝星状细胞的PI3K蛋白的表达减弱(F=26.672,P＜0.05),p-Akt蛋白的表达增强(F=23.522,P＜0.05).结论 硫化氢可能通过激活肝星状细胞PI3K/Akt信号转导通路,增强肝星状细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达.
目的 觀察PI3K/Akt信號轉導通路在硫化氫影響肝星狀細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原錶達中的作用.方法 體外培養大鼠肝星狀細胞-T6,通過外源性硫化氫預處理體外培養的肝星狀細胞,同時給予PI3K/Akt信號轉導通路的特異性阻斷劑LY294002,RT-PCR測定肝星狀細胞的Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白mRNA的錶達,Western blot法檢測PI3K/Akt信號轉導通路上遊蛋白PI3K、p-Akt的錶達情況.用SPSS17.0統計軟件進行單因素方差分析,多箇樣本均數間的多重比較採用LSD-t檢驗分析數據.結果 正常對照組(N組)、二甲基亞砜溶質組(D組)、硫化氫組(S組)、LY294002抑製劑組(LY組)、LY拮抗硫化氫組(LY+S組)Ⅰ型膠原蛋白mRNA的灰度值分彆為0.950±0.201、0.970±0.205、1.270±0.213、0.680±0.161、0.420±0.154,Ⅲ型膠原蛋白mRNA的灰度值分彆為0.740±0.164、0.730±0.177、1.040±0.215、0.510±0.133、0.290±0.101,與正常對照組相比,單獨給予硫化氫組肝星狀細胞的Ⅰ型膠原蛋白mRNA的錶達增彊(F=14.635,P＜0.05),Ⅲ型膠原蛋白mRNA的錶達增彊(F=14.620,P＜ 0.05),與硫化氫組相比,同時給予硫化氫和LY294002組肝星狀細胞的Ⅰ型膠原蛋白mRNA的錶達減弱(F=14.635,P＜ 0.05),Ⅲ型膠原蛋白mRNA的錶達減弱(F=14.620,P＜0.05).N組、D組、S組、LY組、LY+S組PI3K蛋白的灰度值分彆為0.150±0.019、0.170±0.019、0.240±0.027、0.110±0.024、0,060±0.020,p-Akt蛋白的灰度值分彆為1.020±0.097、0.940±0.153、1.330±0.236、0.610±0.055、0.330±0.043,與正常對照組相比,單獨給予硫化氫組肝星狀細胞的PI3K蛋白的錶達增彊(F=26.672,P＜0.05),p-Akt蛋白的錶達增彊(F=23.522,P＜0.05),與硫化氫組相比,同時給予硫化氫和LY294002組肝星狀細胞的PI3K蛋白的錶達減弱(F=26.672,P＜0.05),p-Akt蛋白的錶達增彊(F=23.522,P＜0.05).結論 硫化氫可能通過激活肝星狀細胞PI3K/Akt信號轉導通路,增彊肝星狀細胞Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白mRNA的錶達.
목적 관찰PI3K/Akt신호전도통로재류화경영향간성상세포Ⅰ、Ⅲ형효원표체중적작용.방법 체외배양대서간성상세포-T6,통과외원성류화경예처리체외배양적간성상세포,동시급여PI3K/Akt신호전도통로적특이성조단제LY294002,RT-PCR측정간성상세포적Ⅰ형、Ⅲ형효원단백mRNA적표체,Western blot법검측PI3K/Akt신호전도통로상유단백PI3K、p-Akt적표체정황.용SPSS17.0통계연건진행단인소방차분석,다개양본균수간적다중비교채용LSD-t검험분석수거.결과 정상대조조(N조)、이갑기아풍용질조(D조)、류화경조(S조)、LY294002억제제조(LY조)、LY길항류화경조(LY+S조)Ⅰ형효원단백mRNA적회도치분별위0.950±0.201、0.970±0.205、1.270±0.213、0.680±0.161、0.420±0.154,Ⅲ형효원단백mRNA적회도치분별위0.740±0.164、0.730±0.177、1.040±0.215、0.510±0.133、0.290±0.101,여정상대조조상비,단독급여류화경조간성상세포적Ⅰ형효원단백mRNA적표체증강(F=14.635,P＜0.05),Ⅲ형효원단백mRNA적표체증강(F=14.620,P＜ 0.05),여류화경조상비,동시급여류화경화LY294002조간성상세포적Ⅰ형효원단백mRNA적표체감약(F=14.635,P＜ 0.05),Ⅲ형효원단백mRNA적표체감약(F=14.620,P＜0.05).N조、D조、S조、LY조、LY+S조PI3K단백적회도치분별위0.150±0.019、0.170±0.019、0.240±0.027、0.110±0.024、0,060±0.020,p-Akt단백적회도치분별위1.020±0.097、0.940±0.153、1.330±0.236、0.610±0.055、0.330±0.043,여정상대조조상비,단독급여류화경조간성상세포적PI3K단백적표체증강(F=26.672,P＜0.05),p-Akt단백적표체증강(F=23.522,P＜0.05),여류화경조상비,동시급여류화경화LY294002조간성상세포적PI3K단백적표체감약(F=26.672,P＜0.05),p-Akt단백적표체증강(F=23.522,P＜0.05).결론 류화경가능통과격활간성상세포PI3K/Akt신호전도통로,증강간성상세포Ⅰ형、Ⅲ형효원단백mRNA적표체.
Objective To investigate the role of the PI3K/Akt signaling pathway in hydrogen sulfide-induced alterations in expression of collagen Ⅰ and collagen Ⅲ in hepatic stellate cells.Methods In vitro cultured rat hepatic stellate cells (HSC-T6) were treated with hydrogen sulfide,or left untreated for use as controls,and divided into groups for treatment with different inhibitors for the various factors involved in the PI3K/Akt signaling pathway.Reverse transcription-PCR was used to measure Collagen Ⅰ and collagen Ⅲ mRNA expression.Western blotting was used to detect the protein expression of PI3K and p-Akt,which are upstream proteins of the PI3K/Akt pathway.Results Compared with the untreated control cells,the hydrogen sulfide treated cells showed elevated expression of collagen Ⅰ mRNA (F =14.635,P ＜ 0.05),collagen Ⅲ mRNA (F =14.620,P ＜ 0.05),PI3K protein (F =26.672,P ＜ 0.05),and p-Akt (F =23.522,P ＜ 0.05).Compared to the cells treated with hydrogen sulfide alone,the cells treated with the various inhibitors showed lower expression of collagen Ⅰ mRNA (F =14.635,P ＜ 0.05),collagen Ⅲ mRNA (F=14.620,P ＜ 0.05),PI3K protein (F =26.672,P ＜ 0.05),and p-Akt protein (F =23.522,P ＜ 0.05).Conclusion Hydrogen sulfide can activate the PI3K/Akt pathway and elevate the expression of collagen Ⅰ and collagen Ⅲ in rat hepatic stellate cells.
