中华口腔医学杂志
中華口腔醫學雜誌
중화구강의학잡지
Chinese Journal of Stomatology
2012年
z1期
233-238
,共6页
张泽兵%全海英%张桐菲%白宇%赵轩一
張澤兵%全海英%張桐菲%白宇%趙軒一
장택병%전해영%장동비%백우%조헌일
口腔肿瘤%自噬%顺铂%细胞凋亡
口腔腫瘤%自噬%順鉑%細胞凋亡
구강종류%자서%순박%세포조망
Mouth neoplasms%Autophagy%Cisplatin%Apoptosis
目的 探讨自噬与口腔癌发生、发展的关系及其在口腔癌Tca83细胞中的作用,以期为口腔癌的治疗提供新的靶点.方法 采用免疫组织化学方法,观察自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3在口腔癌和癌旁组织中的表达；在口腔癌Tca83细胞株中加入顺铂(cisplatin),甲基噻唑基四唑(methy thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞生存率的变化,激光共聚焦显微镜检测自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ的表达,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.结果 Beclin-1在口腔癌组织和癌旁组织中的表达率分别为40％(19/47)和12/16；MAP1LC3在口腔癌组织和癌旁组织中的表达率分别为30％(14/47)和10/16,Beclin-1和MAP1LC3在癌组织中的表达率明显低于癌旁组织,两组间差异均有统计学意义(P＜0.05).MTT结果显示,与对照组相比,使用顺铂作用于Tca83细胞,随时间的延长细胞生存率不断降低,P＜0.05；细胞免疫荧光结果显示,对照组荧光染色强度(213±20)显著低于2、6、12、24、48 h组(分别为233±16、315±27、298±46、259±36、225±27),P＜0.05；流式细胞术结果显示,对照组细胞凋亡率(0.68％)显著低于2、6、12、24、48 h组(分别为2.25％、3.08％、5.23％、7.56％、9.46％),P＜0.05.结论 自噬可能与口腔癌的发生、发展相关,不同水平的自噬对口腔癌Tca83细胞的作用不同,Tca83细胞自身基础水平的自噬可以保护Tca83细胞的生存,过度激活的自噬作为一种细胞程序性死亡与凋亡一起促进细胞死亡.
目的 探討自噬與口腔癌髮生、髮展的關繫及其在口腔癌Tca83細胞中的作用,以期為口腔癌的治療提供新的靶點.方法 採用免疫組織化學方法,觀察自噬相關基因Beclin-1和MAP1LC3在口腔癌和癌徬組織中的錶達；在口腔癌Tca83細胞株中加入順鉑(cisplatin),甲基噻唑基四唑(methy thiazolyl tetrazolium,MTT)法檢測細胞生存率的變化,激光共聚焦顯微鏡檢測自噬特異性蛋白LC3-Ⅱ的錶達,膜聯蛋白V-異硫氰痠熒光素流式細胞術檢測細胞凋亡率的變化.結果 Beclin-1在口腔癌組織和癌徬組織中的錶達率分彆為40％(19/47)和12/16；MAP1LC3在口腔癌組織和癌徬組織中的錶達率分彆為30％(14/47)和10/16,Beclin-1和MAP1LC3在癌組織中的錶達率明顯低于癌徬組織,兩組間差異均有統計學意義(P＜0.05).MTT結果顯示,與對照組相比,使用順鉑作用于Tca83細胞,隨時間的延長細胞生存率不斷降低,P＜0.05；細胞免疫熒光結果顯示,對照組熒光染色彊度(213±20)顯著低于2、6、12、24、48 h組(分彆為233±16、315±27、298±46、259±36、225±27),P＜0.05；流式細胞術結果顯示,對照組細胞凋亡率(0.68％)顯著低于2、6、12、24、48 h組(分彆為2.25％、3.08％、5.23％、7.56％、9.46％),P＜0.05.結論 自噬可能與口腔癌的髮生、髮展相關,不同水平的自噬對口腔癌Tca83細胞的作用不同,Tca83細胞自身基礎水平的自噬可以保護Tca83細胞的生存,過度激活的自噬作為一種細胞程序性死亡與凋亡一起促進細胞死亡.
목적 탐토자서여구강암발생、발전적관계급기재구강암Tca83세포중적작용,이기위구강암적치료제공신적파점.방법 채용면역조직화학방법,관찰자서상관기인Beclin-1화MAP1LC3재구강암화암방조직중적표체；재구강암Tca83세포주중가입순박(cisplatin),갑기새서기사서(methy thiazolyl tetrazolium,MTT)법검측세포생존솔적변화,격광공취초현미경검측자서특이성단백LC3-Ⅱ적표체,막련단백V-이류청산형광소류식세포술검측세포조망솔적변화.결과 Beclin-1재구강암조직화암방조직중적표체솔분별위40％(19/47)화12/16；MAP1LC3재구강암조직화암방조직중적표체솔분별위30％(14/47)화10/16,Beclin-1화MAP1LC3재암조직중적표체솔명현저우암방조직,량조간차이균유통계학의의(P＜0.05).MTT결과현시,여대조조상비,사용순박작용우Tca83세포,수시간적연장세포생존솔불단강저,P＜0.05；세포면역형광결과현시,대조조형광염색강도(213±20)현저저우2、6、12、24、48 h조(분별위233±16、315±27、298±46、259±36、225±27),P＜0.05；류식세포술결과현시,대조조세포조망솔(0.68％)현저저우2、6、12、24、48 h조(분별위2.25％、3.08％、5.23％、7.56％、9.46％),P＜0.05.결론 자서가능여구강암적발생、발전상관,불동수평적자서대구강암Tca83세포적작용불동,Tca83세포자신기출수평적자서가이보호Tca83세포적생존,과도격활적자서작위일충세포정서성사망여조망일기촉진세포사망.
Objective To explore the role of autophagy in oral squamous cell carcinoma and its effect on oral squamous cell carcinoma Tca83 cell line.Methods Expression of Beclin-1 and rat microtubule-associated protein light chain-3 (MAP1LC3) were detected in oral squamous cell carcinoma and pericancerous tissues by immunohistochemical (IHC).After treated with cisplatin at different time,Tca83 cells survival rate was examined by methyl thiazolyl tetrazolium(MTT) colorimetry.Autophagosome formation was detected by laser scanning confocal microscope.Apoptosis rate was checked by flow cytometry.Results The expressin of Beclin-1 was found in 40％ (19/47) of the oral squamous cell carcinoma and pericancerous tissues(12/16),and the expression of MAP1LC3 in oral squamous cell carcinoma and peficancerous tissues were 30％ (14/47) and 10/16 respectively.The expression of Beclin-1 and MAP1LC3 in oral squamous cell carcinoma was significantly lower than in peficancerous tissues (P ＜ 0.05).MTT results showed that compared with control group,the survival rate of the Tca83 ceils treated by cisplatin reduced with time (P ＜ 0.05).Immunofluorescence results showed that the average fluorescence intensity of control group (213 ± 20) was significantly lower than those of the other five groups (2 h group:233 ± 16,6 h group:315 ± 27,12 h group:298 ±46,24 h group:259 ± 36,48 h group:225 ± 27) (P ＜ 0.05).Flow cytometry showed that compared with control group,the apoptosis rate increased with time (control group:0.68％,2 h group:2.25％,6 h group:3.08％,12 h group:5.23％,24 h group:7.56％,48 h group:9.46％) (P ＜ 0.05).Conclusions Autophagy may be related to the occurrence and development of oral squamous cell carcinoma.
