中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2014年
1期
50-54
,共5页
柯跃斌%徐新云%梅树江%谢杏%陶功华
柯躍斌%徐新雲%梅樹江%謝杏%陶功華
가약빈%서신운%매수강%사행%도공화
DNA氧化%DNA甲基化%DNA修复
DNA氧化%DNA甲基化%DNA脩複
DNA양화%DNA갑기화%DNA수복
DNA oxidation%DNA methylation%DNA repair
目的 分析体外培养细胞在H2O2染毒后8-oxo-dG的形成、细胞DNA 5-mC含量的变化规律,探讨其时间-剂量-效应关系和DNA氧化与DNA甲基化的关联性.方法 利用0、20、40、60、80和100 μmo]/L H2O2作用于人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),每天染毒1次,每次2h,共持续4d,继续培养8d.应用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平、高效毛细管电泳(high-performancecapillary electrophoresis,HPCE)法检测细胞全基因组DNA5-mC的含量.结果 DNA甲基化与DNA氧化呈现不同特点,A549细胞染毒80 μmol/L H2O2后DNA甲基化水平的改变需要10d以上的时间,而相同条件下DNA氧化水平的改变仅需12h,DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化.H2O2可引起A549细胞甲基化程度降低,呈剂量依赖性关系.在一定的时间剂量范围内,DNA氧化与DNA甲基化作用间呈负相关关系(r=-0.72,P＜0.01).结论 DNA氧化能导致细胞DNA甲基化水平降低,DNA氧化可能是影响细胞甲基化的调控机制之一,在化学物质的毒作用效应中,DNA氧化可能是比DNA甲基化更早的一个重要分子事件.
目的 分析體外培養細胞在H2O2染毒後8-oxo-dG的形成、細胞DNA 5-mC含量的變化規律,探討其時間-劑量-效應關繫和DNA氧化與DNA甲基化的關聯性.方法 利用0、20、40、60、80和100 μmo]/L H2O2作用于人肺泡Ⅱ型上皮細胞(A549),每天染毒1次,每次2h,共持續4d,繼續培養8d.應用高壓液相色譜串聯電化學檢測技術分析細胞DNA 8-oxo-dG水平、高效毛細管電泳(high-performancecapillary electrophoresis,HPCE)法檢測細胞全基因組DNA5-mC的含量.結果 DNA甲基化與DNA氧化呈現不同特點,A549細胞染毒80 μmol/L H2O2後DNA甲基化水平的改變需要10d以上的時間,而相同條件下DNA氧化水平的改變僅需12h,DNA甲基化的改變滯後于DNA氧化.H2O2可引起A549細胞甲基化程度降低,呈劑量依賴性關繫.在一定的時間劑量範圍內,DNA氧化與DNA甲基化作用間呈負相關關繫(r=-0.72,P＜0.01).結論 DNA氧化能導緻細胞DNA甲基化水平降低,DNA氧化可能是影響細胞甲基化的調控機製之一,在化學物質的毒作用效應中,DNA氧化可能是比DNA甲基化更早的一箇重要分子事件.
목적 분석체외배양세포재H2O2염독후8-oxo-dG적형성、세포DNA 5-mC함량적변화규률,탐토기시간-제량-효응관계화DNA양화여DNA갑기화적관련성.방법 이용0、20、40、60、80화100 μmo]/L H2O2작용우인폐포Ⅱ형상피세포(A549),매천염독1차,매차2h,공지속4d,계속배양8d.응용고압액상색보천련전화학검측기술분석세포DNA 8-oxo-dG수평、고효모세관전영(high-performancecapillary electrophoresis,HPCE)법검측세포전기인조DNA5-mC적함량.결과 DNA갑기화여DNA양화정현불동특점,A549세포염독80 μmol/L H2O2후DNA갑기화수평적개변수요10d이상적시간,이상동조건하DNA양화수평적개변부수12h,DNA갑기화적개변체후우DNA양화.H2O2가인기A549세포갑기화정도강저,정제량의뢰성관계.재일정적시간제량범위내,DNA양화여DNA갑기화작용간정부상관관계(r=-0.72,P＜0.01).결론 DNA양화능도치세포DNA갑기화수평강저,DNA양화가능시영향세포갑기화적조공궤제지일,재화학물질적독작용효응중,DNA양화가능시비DNA갑기화경조적일개중요분자사건.
Objective To study the potential association of DNA oxidation and DNA methylation,in vitro cultured cells were exposed to different doses of H2O2,8-oxo-dG formation,cell DNA 5-mC contents were analyzed to explore the time-dose-response relationship of DNA oxidation and DNA methylation.Methods A549 cells were exposed to different doses of H2O2,8-oxo-dG formation and cell genomic DNA 5-mC contents were analyzed by a high-performance liquid chromatography system and high performance capillary electrophoresis (HPCE),respectively.Results H2O2 induced the formation of 8-oxo-dG and 5-mC in different characteristics,it need at least 10 days for significant changes in the level of DNA methylation,whereas under the same conditions,changes in the level of DNA oxidation cast only 12 hours.H2O2 induced decreased levels of DNA methylation in A549 cells in a dose-dependent manner.In a certain range of time and dose,it showed a negative correlation between DNA oxidation and DNA methylation.Conclusion The study suggests that oxidative DNA could lead to reduced levels of DNA methylation,DNA oxidation may affect the regulation of cellular methylation mechanisms,in the course of chemical mutagenesis,DNA oxidation may be an earlier important molecule event than DNA methylation.
