中华烧伤杂志
中華燒傷雜誌
중화소상잡지
16
2013年
3期
312-314
,共3页
杨文贤%朱富军%詹球%吕礼芳%王磊%刘亮%辛海明%童亚林
楊文賢%硃富軍%詹毬%呂禮芳%王磊%劉亮%辛海明%童亞林
양문현%주부군%첨구%려례방%왕뢰%류량%신해명%동아림
锥虫蓝%着色剂%羊膜%时间因素%浓度因素
錐蟲藍%著色劑%羊膜%時間因素%濃度因素
추충람%착색제%양막%시간인소%농도인소
目的 摸索锥虫蓝直接染色法在人羊膜细胞活力快速鉴定中的适宜浓度及染色时间.方法 取健康剖宫产产妇的胎膜6张,浸泡后分离羊膜并剪成1 cm×1 cm备用.(1)取部分制备好的羊膜分别浸泡于1、2、3、4 g/L4种浓度的锥虫蓝溶液中,每个浓度下各浸泡1、3、4、10 min后取出,在PBS中漂洗30s,更换PBS,继续漂洗30 s.存光学显微镜下选取4个视野拍照,每个视野计数1000个细胞,同时计数蓝染细胞计算细胞死亡率.(2)另取部分制备好的羊膜浸泡于0.5 g/L氯己定1h后行锥虫蓝直接染色,锥虫蓝溶液浓度与染色时间为前一实验结果选定的浓度、时间,并与1 g/L锥虫蓝染色10 min对比.后续操作及检测同前一试验.对数据行两因素析因设计方差分析、Duncan多范围检验及LSD检验. 结果 (1)1、2、3 g/L锥虫蓝染色1、3 min后细胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色4、10 min后细胞死亡率明显高于1、3 min(P值均小于0.05).4 g/L锥虫蓝染色1、3、4 min后细胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色10 min后细胞死亡率显著高于1、3min(P值均小于0.05).锥虫蓝浓度为2、3、4 g/L时,各时相点细胞死亡率都显著高于1 g/L(P值均小于0.05).(2)对经0.5 g/L氯己定浸泡1h羊膜染色显示,1 g/L锥虫蓝染色1 min细胞死亡率[(72.6±7.4)％]显著低于预计死亡率(100.0％,P ＜0.05),染色3 min细胞死亡率[(95.3±5.6)％]、染色10 min细胞死亡率[(99.8±5.0)％]与预计死亡率相近(P值均大于0.05). 结论 锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力的适宜方案为浓度1 g/L,染色时间3 min.
目的 摸索錐蟲藍直接染色法在人羊膜細胞活力快速鑒定中的適宜濃度及染色時間.方法 取健康剖宮產產婦的胎膜6張,浸泡後分離羊膜併剪成1 cm×1 cm備用.(1)取部分製備好的羊膜分彆浸泡于1、2、3、4 g/L4種濃度的錐蟲藍溶液中,每箇濃度下各浸泡1、3、4、10 min後取齣,在PBS中漂洗30s,更換PBS,繼續漂洗30 s.存光學顯微鏡下選取4箇視野拍照,每箇視野計數1000箇細胞,同時計數藍染細胞計算細胞死亡率.(2)另取部分製備好的羊膜浸泡于0.5 g/L氯己定1h後行錐蟲藍直接染色,錐蟲藍溶液濃度與染色時間為前一實驗結果選定的濃度、時間,併與1 g/L錐蟲藍染色10 min對比.後續操作及檢測同前一試驗.對數據行兩因素析因設計方差分析、Duncan多範圍檢驗及LSD檢驗. 結果 (1)1、2、3 g/L錐蟲藍染色1、3 min後細胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色4、10 min後細胞死亡率明顯高于1、3 min(P值均小于0.05).4 g/L錐蟲藍染色1、3、4 min後細胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色10 min後細胞死亡率顯著高于1、3min(P值均小于0.05).錐蟲藍濃度為2、3、4 g/L時,各時相點細胞死亡率都顯著高于1 g/L(P值均小于0.05).(2)對經0.5 g/L氯己定浸泡1h羊膜染色顯示,1 g/L錐蟲藍染色1 min細胞死亡率[(72.6±7.4)％]顯著低于預計死亡率(100.0％,P ＜0.05),染色3 min細胞死亡率[(95.3±5.6)％]、染色10 min細胞死亡率[(99.8±5.0)％]與預計死亡率相近(P值均大于0.05). 結論 錐蟲藍直接染色法鑒定人羊膜細胞活力的適宜方案為濃度1 g/L,染色時間3 min.
목적 모색추충람직접염색법재인양막세포활력쾌속감정중적괄의농도급염색시간.방법 취건강부궁산산부적태막6장,침포후분리양막병전성1 cm×1 cm비용.(1)취부분제비호적양막분별침포우1、2、3、4 g/L4충농도적추충람용액중,매개농도하각침포1、3、4、10 min후취출,재PBS중표세30s,경환PBS,계속표세30 s.존광학현미경하선취4개시야박조,매개시야계수1000개세포,동시계수람염세포계산세포사망솔.(2)령취부분제비호적양막침포우0.5 g/L록기정1h후행추충람직접염색,추충람용액농도여염색시간위전일실험결과선정적농도、시간,병여1 g/L추충람염색10 min대비.후속조작급검측동전일시험.대수거행량인소석인설계방차분석、Duncan다범위검험급LSD검험. 결과 (1)1、2、3 g/L추충람염색1、3 min후세포사망솔상근(P치균대우0.05),염색4、10 min후세포사망솔명현고우1、3 min(P치균소우0.05).4 g/L추충람염색1、3、4 min후세포사망솔상근(P치균대우0.05),염색10 min후세포사망솔현저고우1、3min(P치균소우0.05).추충람농도위2、3、4 g/L시,각시상점세포사망솔도현저고우1 g/L(P치균소우0.05).(2)대경0.5 g/L록기정침포1h양막염색현시,1 g/L추충람염색1 min세포사망솔[(72.6±7.4)％]현저저우예계사망솔(100.0％,P ＜0.05),염색3 min세포사망솔[(95.3±5.6)％]、염색10 min세포사망솔[(99.8±5.0)％]여예계사망솔상근(P치균대우0.05). 결론 추충람직접염색법감정인양막세포활력적괄의방안위농도1 g/L,염색시간3 min.
