中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2014年
5期
324-326
,共3页
李伟红%李建东%李阿茜%曲靖%王芹%张福顺%芜为%孙丽娜%张硕
李偉紅%李建東%李阿茜%麯靖%王芹%張福順%蕪為%孫麗娜%張碩
리위홍%리건동%리아천%곡정%왕근%장복순%무위%손려나%장석
RNA%逆转录聚合酶链反应%埃博拉病毒
RNA%逆轉錄聚閤酶鏈反應%埃博拉病毒
RNA%역전록취합매련반응%애박랍병독
RNA%Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)%Ebola virus
目的 建立一种安全、简便、可靠的适用于血标本中有包膜RNA病毒核酸提取的方法,保证埃博拉病毒核酸筛查的实验室安全,提高标本的核酸检测效率.方法 根据已发表可完全灭活埃博拉病毒的方法,通过实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)方法,比较分析QIAamp Viral RNA Mini试剂盒、TRIzol(或TriPure)试剂裂解样本并用或不用氯仿萃取后结合QIAamp Viral RNA Mini试剂盒等3种方法提取核酸的效率,优化反应步骤,建立一种安全、简便的血标本中病毒RNA提取方法.结果 血标本经TRIzol(或TriPure)试剂处理后,不经氯仿萃取,与QIAamp Viral RNA Mini试剂盒结合,提取病毒RNA,RNA提取效率优于QIAamp Viral RNA Mini试剂盒和美国CDC推荐的方法.结论 采用TRIzol(或TriPure)试剂裂解病毒,结合QIAamp Viral RNAMini试剂盒提取病毒RNA的方法简便、可靠,可用于埃博拉出血热相关标本的核酸检测.
目的 建立一種安全、簡便、可靠的適用于血標本中有包膜RNA病毒覈痠提取的方法,保證埃博拉病毒覈痠篩查的實驗室安全,提高標本的覈痠檢測效率.方法 根據已髮錶可完全滅活埃博拉病毒的方法,通過實時熒光逆轉錄聚閤酶鏈反應(real-time RT-PCR)方法,比較分析QIAamp Viral RNA Mini試劑盒、TRIzol(或TriPure)試劑裂解樣本併用或不用氯倣萃取後結閤QIAamp Viral RNA Mini試劑盒等3種方法提取覈痠的效率,優化反應步驟,建立一種安全、簡便的血標本中病毒RNA提取方法.結果 血標本經TRIzol(或TriPure)試劑處理後,不經氯倣萃取,與QIAamp Viral RNA Mini試劑盒結閤,提取病毒RNA,RNA提取效率優于QIAamp Viral RNA Mini試劑盒和美國CDC推薦的方法.結論 採用TRIzol(或TriPure)試劑裂解病毒,結閤QIAamp Viral RNAMini試劑盒提取病毒RNA的方法簡便、可靠,可用于埃博拉齣血熱相關標本的覈痠檢測.
목적 건립일충안전、간편、가고적괄용우혈표본중유포막RNA병독핵산제취적방법,보증애박랍병독핵산사사적실험실안전,제고표본적핵산검측효솔.방법 근거이발표가완전멸활애박랍병독적방법,통과실시형광역전록취합매련반응(real-time RT-PCR)방법,비교분석QIAamp Viral RNA Mini시제합、TRIzol(혹TriPure)시제렬해양본병용혹불용록방췌취후결합QIAamp Viral RNA Mini시제합등3충방법제취핵산적효솔,우화반응보취,건립일충안전、간편적혈표본중병독RNA제취방법.결과 혈표본경TRIzol(혹TriPure)시제처리후,불경록방췌취,여QIAamp Viral RNA Mini시제합결합,제취병독RNA,RNA제취효솔우우QIAamp Viral RNA Mini시제합화미국CDC추천적방법.결론 채용TRIzol(혹TriPure)시제렬해병독,결합QIAamp Viral RNAMini시제합제취병독RNA적방법간편、가고,가용우애박랍출혈열상관표본적핵산검측.
Objective To set up a safe,easy and reliable method of viral RNA extraction from serum samples.Methods Three viral RNA extraction methods were compared by using real-time RT-PCR,using QIAamp Viral RNA Mini Kit,TRIzol(or TriPure) reagents adapted to QIAamp Viral RNA Mini Kit with or without chloroform extraction.Results The efficiency of the RNA extraction of TRIzol (or TriPure) adapted to QIAamp Viral RNA Mini Kit without using chloroform extraction was the same with or better than other methods.Conclusion Using TRIzol(or TriPure) Reagents without chloroform adapted to QIAamp Viral RNA Mini Kit was safe,easy and reliable.The new method can be used for the detection of Ebola Hemorrhagic fever related samples.
