中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2013年
8期
1701-1703
,共3页
转黎%王涛%李明超%张岩%刘继红%叶章群
轉黎%王濤%李明超%張巖%劉繼紅%葉章群
전려%왕도%리명초%장암%류계홍%협장군
氯甲基苯甲酰氨%5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷%示踪%脂肪干细胞
氯甲基苯甲酰氨%5-乙炔基-2'-脫氧尿嘧啶覈苷%示蹤%脂肪榦細胞
록갑기분갑선안%5-을결기-2'-탈양뇨밀정핵감%시종%지방간세포
Chloromethyl-benzamidodialkylcarbocyanine%5-ethynyl-2'-deoxyuridine%Tracer%Adipose-derived stem cell
目的 比较研究氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)和5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的体外标记示踪效果,为ADSCs移植治疗勃起功能障碍体内研究寻找最佳的干细胞示踪剂.方法 分离和培养SD大鼠ADSCs,分别采用10μmol/L CM-Dil荧光活性染料和50 μmol/L EdU标记第4代ADSCs,并通过流式细胞术和荧光显微镜检测标记后第7、14、21、28天细胞阳性率.结果 CM-Dil和EdU两者对ADSCs生物学特性均无明显影响.CM-Dil标记ADSCs阳性率达(99.6±0.2)％,第21天后荧光开始衰减,第35天细胞阳性率仍达(64.2±3.3)％；EdU标记ADSCs阳性率为(87.1±1.8)％,7d后细胞阳性率逐渐降低,第14天后急剧降低,第28天细胞阳性率为(14.4±2.7)％.结论 CM-Dil和EdU两者均适用于ADSCs标记示踪,CM-Dil标记具有操作简单、标记阳性率高、荧光持久等优点,适用于长期标记示踪,EdU仅适用于短期标记示踪.
目的 比較研究氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)和5-乙炔基-2’-脫氧尿嘧啶覈苷(EdU)對大鼠脂肪榦細胞(ADSCs)的體外標記示蹤效果,為ADSCs移植治療勃起功能障礙體內研究尋找最佳的榦細胞示蹤劑.方法 分離和培養SD大鼠ADSCs,分彆採用10μmol/L CM-Dil熒光活性染料和50 μmol/L EdU標記第4代ADSCs,併通過流式細胞術和熒光顯微鏡檢測標記後第7、14、21、28天細胞暘性率.結果 CM-Dil和EdU兩者對ADSCs生物學特性均無明顯影響.CM-Dil標記ADSCs暘性率達(99.6±0.2)％,第21天後熒光開始衰減,第35天細胞暘性率仍達(64.2±3.3)％；EdU標記ADSCs暘性率為(87.1±1.8)％,7d後細胞暘性率逐漸降低,第14天後急劇降低,第28天細胞暘性率為(14.4±2.7)％.結論 CM-Dil和EdU兩者均適用于ADSCs標記示蹤,CM-Dil標記具有操作簡單、標記暘性率高、熒光持久等優點,適用于長期標記示蹤,EdU僅適用于短期標記示蹤.
목적 비교연구록갑기분갑선안(CM-Dil)화5-을결기-2’-탈양뇨밀정핵감(EdU)대대서지방간세포(ADSCs)적체외표기시종효과,위ADSCs이식치료발기공능장애체내연구심조최가적간세포시종제.방법 분리화배양SD대서ADSCs,분별채용10μmol/L CM-Dil형광활성염료화50 μmol/L EdU표기제4대ADSCs,병통과류식세포술화형광현미경검측표기후제7、14、21、28천세포양성솔.결과 CM-Dil화EdU량자대ADSCs생물학특성균무명현영향.CM-Dil표기ADSCs양성솔체(99.6±0.2)％,제21천후형광개시쇠감,제35천세포양성솔잉체(64.2±3.3)％；EdU표기ADSCs양성솔위(87.1±1.8)％,7d후세포양성솔축점강저,제14천후급극강저,제28천세포양성솔위(14.4±2.7)％.결론 CM-Dil화EdU량자균괄용우ADSCs표기시종,CM-Dil표기구유조작간단、표기양성솔고、형광지구등우점,괄용우장기표기시종,EdU부괄용우단기표기시종.
Objective To compare the labeling effects of chloromethyl-benzamidodialkylcarbocyanine (CM-Dil) vs.5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) on rat adipose-derived stem cells (ADSCs),and seek the optimal stem cell labeling technique applied to erectile dysfunction (ElD) therapy.Methods Rat ADSCs were isolated and cultured from the adipose tissue of inguinal region.The ADSCs at the fourth passage were labeled with 10 μmol/L CM-Dil or 50 μmol/L EdU,and the positive cell rate and fluorescence intensity were detected by using flow cytometry and fluorescence microscope at 7th,14th,21st and 28th day,respectively.Results CM-Dil and EdU had no effects on the proliferation of ADSCs.The positive rate of CM-Dil labeling was (99.6 ±0.2)％,and fluorescence decay began at 21st day,and the positive rate was (64.2 ± 3.3) ％ at 35th day.The positive rate of EdU labeling was (87.1 ± 1.8) ％,and decreased at 7th day,and the positive rate was only (14.4 ± 2.7) ％ at 28th day.Conclusion CM-Dil and EdU were suitable for ADSCs tracker labeling.However,CM-Dil gains much more advantages than EdU in long-term tracing,which may be an ideal ADSCs tracing technology in the future treatment of ED.
