中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2014年
8期
1752-1755
,共4页
余翔%王兴伟%李泉%毛永欢%骆霞岗%竺慧%沈佳佳%王伟林%喻春钊
餘翔%王興偉%李泉%毛永歡%駱霞崗%竺慧%瀋佳佳%王偉林%喻春釗
여상%왕흥위%리천%모영환%락하강%축혜%침가가%왕위림%유춘쇠
胰腺癌%吉西他滨%脱噬作用%保罗样激酶-1
胰腺癌%吉西他濱%脫噬作用%保囉樣激酶-1
이선암%길서타빈%탈서작용%보라양격매-1
Pancreatic carcinoma%Gemcitabine%Apoptosis%Polo-like kinase-1
目的 观察吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1(PLK-1)表达的影响.方法 采用不同浓度的吉西他滨处理胰腺癌AsPC-1细胞,在电镜下观察细胞的形态,噻唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制情况;不同浓度(2、5 μmol/L)的吉西他滨处理细胞12、24、48、72 h后,流式细胞分析法检测细胞凋亡,以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达.结果 MTT结果示随吉西他滨浓度增加,细胞增殖率明显下降(P＜0.05);流式细胞分析法检测凋亡结果示:处理组凋亡率较空白对照组明显增加(P＜0.05);RT-PCR和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达结果显示,不同时间点PLK-1 mRNA相对表达量分别为:对照组0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L组:0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L组:0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25及PLK-1蛋白的表达水平分别为:对照组:0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L组:0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L组:0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,也相应升高(P＜0.05).结论 吉西他滨能诱导AsPC-1细胞凋亡,其机制可能与细胞内的PLK-1水平改变有关.PLK-1基因表达水平与胰腺癌化疗药物敏感性密切相关.
目的 觀察吉西他濱對胰腺癌細胞增殖、凋亡及保囉樣激酶-1(PLK-1)錶達的影響.方法 採用不同濃度的吉西他濱處理胰腺癌AsPC-1細胞,在電鏡下觀察細胞的形態,噻唑藍(MTT)法測定細胞生長抑製情況;不同濃度(2、5 μmol/L)的吉西他濱處理細胞12、24、48、72 h後,流式細胞分析法檢測細胞凋亡,以半定量逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western blot檢測PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的錶達.結果 MTT結果示隨吉西他濱濃度增加,細胞增殖率明顯下降(P＜0.05);流式細胞分析法檢測凋亡結果示:處理組凋亡率較空白對照組明顯增加(P＜0.05);RT-PCR和Western blot檢測PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的錶達結果顯示,不同時間點PLK-1 mRNA相對錶達量分彆為:對照組0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L組:0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L組:0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25及PLK-1蛋白的錶達水平分彆為:對照組:0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L組:0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L組:0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,也相應升高(P＜0.05).結論 吉西他濱能誘導AsPC-1細胞凋亡,其機製可能與細胞內的PLK-1水平改變有關.PLK-1基因錶達水平與胰腺癌化療藥物敏感性密切相關.
목적 관찰길서타빈대이선암세포증식、조망급보라양격매-1(PLK-1)표체적영향.방법 채용불동농도적길서타빈처리이선암AsPC-1세포,재전경하관찰세포적형태,새서람(MTT)법측정세포생장억제정황;불동농도(2、5 μmol/L)적길서타빈처리세포12、24、48、72 h후,류식세포분석법검측세포조망,이반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)화Western blot검측PLK-1 mRNA급PLK-1단백적표체.결과 MTT결과시수길서타빈농도증가,세포증식솔명현하강(P＜0.05);류식세포분석법검측조망결과시:처리조조망솔교공백대조조명현증가(P＜0.05);RT-PCR화Western blot검측PLK-1 mRNA급PLK-1단백적표체결과현시,불동시간점PLK-1 mRNA상대표체량분별위:대조조0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L조:0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L조:0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25급PLK-1단백적표체수평분별위:대조조:0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L조:0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L조:0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,야상응승고(P＜0.05).결론 길서타빈능유도AsPC-1세포조망,기궤제가능여세포내적PLK-1수평개변유관.PLK-1기인표체수평여이선암화료약물민감성밀절상관.
Objective To investigate the effect of gemcitabine on proliferation,apoptosis and polo-like kinase-1 (PLK-1) expression of human pancreatic cancer cell line AsPC-1 cells.Methods AsPC-1 cells were treated with various concentrations of gemcitabine for different time.The effect of gemcitabine on survival of AsPC-1 cells was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay.The effect of gemcitabine on apoptosis of AsPC-1 cells was mearsured by flow cytometry with various concentrations of 2 and 5 μmol/L,and at different time points (12,24,48,and 72 h).The expression levels of PLK-1 mRNA and protein were detected by semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting,respectively.Results Gemcitabine decreased the proliferation of pancreatic cancer cells (P ＜ 0.05),and the apoptosis rate was significantly increased (P ＜ 0.05).After treatment with gemcitabine,the expression levels of PLK-1 mRNA (control:0.70 ±0.15,0.65 ±0.27,0.72 ±0.13,0.68 ±0.30;2 μmol/L:0.88 ±0.58,0.95 ±0.53,2.36 ±0.57,3.53 ±0.89;5 μmol/L:0.89 ± 0.60,1.02 ± 0.32,3.95 ± 1.84,4.52 ± 2.25) and protein (control:0.82 ± 0.41,0.78 ± 0.46,1.01 ±0.05,0.88 ±0.25 ;2 μmol/L:0.89 ±0.28,1.61 ±0.88,1.66 ±0.18,3.28 ± 1.33 ;5 μmol/L:0.85 ± 0.36,1.89 ± 0.18,2.73 ± 0.78,4.32 ± 2.13) were also increased significantly in pancreatic cancer cells (P ＜ 0.05).Conclusion Gemcitabine can influence the proliferation and apoptosis of AsPC-1 cells probably by the expression changes of PLK-1.
