前列腺干细胞抗原与热休克蛋白70羧基端结构域的融合表达及纯化
전렬선간세포항원여열휴극단백70최기단결구역적융합표체급순화
  • 万方数据
    军医进修学院学报 군의진수학원학보
    ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
    2012年 12期 1296-1298 ,共3页

    董磊%张晓鹏%易绍琼%任军%侯利华%付玲%于长明%陈薇

    동뢰%장효붕%역소경%임군%후리화%부령%우장명%진미

    前列腺干细胞抗原%热休克蛋白%重组融合蛋白类 前列腺榦細胞抗原%熱休剋蛋白%重組融閤蛋白類
    전렬선간세포항원%열휴극단백%중조융합단백류
    目的构建前列腺干细胞抗原(prostate stem cell antigen,PSCA)及热休克蛋白70(heat-shock protein,HSP70)羧基端结构域的重组表达质粒,对重组融合蛋白进行诱导、表达及纯化,为肿瘤疫苗的研究奠定基础.方法克隆人HSP70羧基端基因及PSCA基因,构建重组表达载体pET21-PSCA-HSPC,重组融合蛋白经(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,利用单克隆抗体进行Western blot鉴定,最后进行蛋白纯化.结果成功构建了重组表达质粒pET21-PSCA-HSPC;SDS-PAGE结果显示目的蛋白以可溶性形式存在,经镍柱亲和层析、苯基柱疏水及凝胶过滤柱纯化后,重组融合蛋白纯度在95%以上.结论该研究成功实现了PSCA与HSP70羧基端结构域的可溶性表达.
    목적구건전렬선간세포항원(prostate stem cell antigen,PSCA)급열휴극단백70(heat-shock protein,HSP70)최기단결구역적중조표체질립,대중조융합단백진행유도、표체급순화,위종류역묘적연구전정기출.방법극륭인HSP70최기단기인급PSCA기인,구건중조표체재체pET21-PSCA-HSPC,중조융합단백경(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)진행유도표체,이용단극륭항체진행Western blot감정,최후진행단백순화.결과성공구건료중조표체질립pET21-PSCA-HSPC;SDS-PAGE결과현시목적단백이가용성형식존재,경얼주친화층석、분기주소수급응효과려주순화후,중조융합단백순도재95%이상.결론해연구성공실현료PSCA여HSP70최기단결구역적가용성표체.
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