湘南学院学报
湘南學院學報
상남학원학보
JOURNAL OF XIANGNAN UNIVERSITY
2012年
5期
33-36
,共4页
苏勇%蔡哲彦%江志钢%袁婺洲%吴秀山
囌勇%蔡哲彥%江誌鋼%袁婺洲%吳秀山
소용%채철언%강지강%원무주%오수산
Dox-A3基因%果蝇%原核表达%多克隆抗体
Dox-A3基因%果蠅%原覈錶達%多剋隆抗體
Dox-A3기인%과승%원핵표체%다극륭항체
从野生型成体果蝇体内提取总RNA ,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox -A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta ,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体,通过Western-Blot检测效价和特异性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.
從野生型成體果蠅體內提取總RNA ,以cDNA作為模闆進行PCR擴增,穫取Dox -A3部分基因片段,將這片段連接于原覈錶達載體pET-28a上,成功構建重組質粒pET-28a-Dox-A3.將重組質粒轉化大腸桿菌菌株Rosetta ,用ITPG誘導錶達齣融閤蛋白,然後將經Ni-IDA凝膠柱純化的融閤蛋白免疫新西蘭大白兔製備Dox-A3多剋隆抗體,通過Western-Blot檢測效價和特異性.結果錶明,實驗穫得瞭高質量的多剋隆抗體.
종야생형성체과승체내제취총RNA ,이cDNA작위모판진행PCR확증,획취Dox -A3부분기인편단,장저편단련접우원핵표체재체pET-28a상,성공구건중조질립pET-28a-Dox-A3.장중조질립전화대장간균균주Rosetta ,용ITPG유도표체출융합단백,연후장경Ni-IDA응효주순화적융합단백면역신서란대백토제비Dox-A3다극륭항체,통과Western-Blot검측효개화특이성.결과표명,실험획득료고질량적다극륭항체.
