东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
9期
51-55
,共5页
贾明玉%佟慧丽%李树峰%赵丹丹%严云勤*
賈明玉%佟慧麗%李樹峰%趙丹丹%嚴雲勤*
가명옥%동혜려%리수봉%조단단%엄운근*
肌肉抑制素前肽%流式细胞术%细胞增殖
肌肉抑製素前肽%流式細胞術%細胞增殖
기육억제소전태%류식세포술%세포증식
通过PCR扩增目的基因,构建真核表达载体,利用PEI转染牛肌卫星细胞,转染后48与72 h通过CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖的变化,通过RT-PCR检测目的基因的表达,通过RT-PCR与Western blot检测下游基因P21,CDK2的表达变化.结果表明,在两个时间点,实验组细胞活力明显升高(P<0.01),G0/G1期细胞所占的比例明显下降(P<0.01),S期细胞所占比例明显上升(P<0.01),MSTN前肽基因有大量表达,P21表达下降,CDK2表达上升.结果揭示,在牛肌卫星细胞中,MSTN前肽通过下调P21,上调CDK2的表达量促进细胞增殖.旨在揭示牛MSTN前肽基因对牛肌卫星细胞(MDSC)增殖的影响,为后续的转基因牛试验提供理论依据.
通過PCR擴增目的基因,構建真覈錶達載體,利用PEI轉染牛肌衛星細胞,轉染後48與72 h通過CCK-8與流式細胞術檢測細胞增殖的變化,通過RT-PCR檢測目的基因的錶達,通過RT-PCR與Western blot檢測下遊基因P21,CDK2的錶達變化.結果錶明,在兩箇時間點,實驗組細胞活力明顯升高(P<0.01),G0/G1期細胞所佔的比例明顯下降(P<0.01),S期細胞所佔比例明顯上升(P<0.01),MSTN前肽基因有大量錶達,P21錶達下降,CDK2錶達上升.結果揭示,在牛肌衛星細胞中,MSTN前肽通過下調P21,上調CDK2的錶達量促進細胞增殖.旨在揭示牛MSTN前肽基因對牛肌衛星細胞(MDSC)增殖的影響,為後續的轉基因牛試驗提供理論依據.
통과PCR확증목적기인,구건진핵표체재체,이용PEI전염우기위성세포,전염후48여72 h통과CCK-8여류식세포술검측세포증식적변화,통과RT-PCR검측목적기인적표체,통과RT-PCR여Western blot검측하유기인P21,CDK2적표체변화.결과표명,재량개시간점,실험조세포활력명현승고(P<0.01),G0/G1기세포소점적비례명현하강(P<0.01),S기세포소점비례명현상승(P<0.01),MSTN전태기인유대량표체,P21표체하강,CDK2표체상승.결과게시,재우기위성세포중,MSTN전태통과하조P21,상조CDK2적표체량촉진세포증식.지재게시우MSTN전태기인대우기위성세포(MDSC)증식적영향,위후속적전기인우시험제공이론의거.
