东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
9期
90-95
,共6页
高建伟%鲁承%崔正云%崔成都%贾文影%李刚
高建偉%魯承%崔正雲%崔成都%賈文影%李剛
고건위%로승%최정운%최성도%가문영%리강
不同基因组DNA模板%微卫星%PCR扩增
不同基因組DNA模闆%微衛星%PCR擴增
불동기인조DNA모판%미위성%PCR확증
文章主要探讨使用黑熊毛发作为试验材料替代其他生物样品进行遗传多样性研究的可行性,筛选满足试验需求的最佳使用量.以延边白头山制药有限公司养熊场的4头成年东北黑熊为试验材料,分别5次拾取2头黑熊铁笼内散落的带有毛囊的50、100根毛发,对麻醉的2头黑熊抽取全血3 mL以及皮下结缔组织1 g,并分别采用不同方法提取基因组DNA.以微卫星位点ABB12和UT35为引物,设置20、50、100 ng·μL-13种模板浓度进行PCR扩增.结果显示,采用50 ng·μL-1的模板浓度均可获得较好的PCR产物,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增基因具有较好的分辨效果.毛发DNA、血液DNA和组织DNA的PCR产物数量和质量并无明显差异.毛发数量与所提取的DNA浓度有一定关系.利用15个毛发DNA的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,均可观察到清晰的条带.研究结果进一步证明毛发DNA可作为东北黑熊遗传多样性研究的试验材料.
文章主要探討使用黑熊毛髮作為試驗材料替代其他生物樣品進行遺傳多樣性研究的可行性,篩選滿足試驗需求的最佳使用量.以延邊白頭山製藥有限公司養熊場的4頭成年東北黑熊為試驗材料,分彆5次拾取2頭黑熊鐵籠內散落的帶有毛囊的50、100根毛髮,對痳醉的2頭黑熊抽取全血3 mL以及皮下結締組織1 g,併分彆採用不同方法提取基因組DNA.以微衛星位點ABB12和UT35為引物,設置20、50、100 ng·μL-13種模闆濃度進行PCR擴增.結果顯示,採用50 ng·μL-1的模闆濃度均可穫得較好的PCR產物,採用聚丙烯酰胺凝膠電泳對擴增基因具有較好的分辨效果.毛髮DNA、血液DNA和組織DNA的PCR產物數量和質量併無明顯差異.毛髮數量與所提取的DNA濃度有一定關繫.利用15箇毛髮DNA的PCR產物進行聚丙烯酰胺凝膠電泳,均可觀察到清晰的條帶.研究結果進一步證明毛髮DNA可作為東北黑熊遺傳多樣性研究的試驗材料.
문장주요탐토사용흑웅모발작위시험재료체대기타생물양품진행유전다양성연구적가행성,사선만족시험수구적최가사용량.이연변백두산제약유한공사양웅장적4두성년동북흑웅위시험재료,분별5차습취2두흑웅철롱내산락적대유모낭적50、100근모발,대마취적2두흑웅추취전혈3 mL이급피하결체조직1 g,병분별채용불동방법제취기인조DNA.이미위성위점ABB12화UT35위인물,설치20、50、100 ng·μL-13충모판농도진행PCR확증.결과현시,채용50 ng·μL-1적모판농도균가획득교호적PCR산물,채용취병희선알응효전영대확증기인구유교호적분변효과.모발DNA、혈액DNA화조직DNA적PCR산물수량화질량병무명현차이.모발수량여소제취적DNA농도유일정관계.이용15개모발DNA적PCR산물진행취병희선알응효전영,균가관찰도청석적조대.연구결과진일보증명모발DNA가작위동북흑웅유전다양성연구적시험재료.
