大连大学学报
大連大學學報
대련대학학보
JOURNAL OF DALIAN UNIVERSITY
2012年
6期
71-77
,共7页
逄越*%龚兴旺%黄金莎%李庆伟
逄越*%龔興旺%黃金莎%李慶偉
방월*%공흥왕%황금사%리경위
增殖细胞核抗原%七鳃鳗%表达序列标签%真核表达载体
增殖細胞覈抗原%七鰓鰻%錶達序列標籤%真覈錶達載體
증식세포핵항원%칠새만%표체서렬표첨%진핵표체재체
增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),也称周期蛋白或DNA聚合酶的辅助蛋白,是真核细胞合成所必需的核蛋白,在DNA复制中起重要作用.前期实验发现日本七鳃鳗肝脏cDNA文库的表达序列标签(Expressed Sequence Tag, EST)中存在与高等脊椎动物pcna基因同源的序列.提取日本七鳃鳗(Lampetra japonica)肝脏组织RNA,通过RT-PCR方法扩增七鳃鳗pcna基因,对其进行生物信息学分析,并将Lj-pcna基因成功构建到pGFP-N2真核表达载体上,重组质粒PGFP-N2-Lj-pcna转染人Hela细胞,荧光显微镜下观察有荧光蛋白的表达.日本七鳃鳗pcna基因的真核表达载体成功构建和转染,为探讨七鳃鳗pcna基因功能研究及其它七鳃鳗相关研究提供条件.
增殖細胞覈抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),也稱週期蛋白或DNA聚閤酶的輔助蛋白,是真覈細胞閤成所必需的覈蛋白,在DNA複製中起重要作用.前期實驗髮現日本七鰓鰻肝髒cDNA文庫的錶達序列標籤(Expressed Sequence Tag, EST)中存在與高等脊椎動物pcna基因同源的序列.提取日本七鰓鰻(Lampetra japonica)肝髒組織RNA,通過RT-PCR方法擴增七鰓鰻pcna基因,對其進行生物信息學分析,併將Lj-pcna基因成功構建到pGFP-N2真覈錶達載體上,重組質粒PGFP-N2-Lj-pcna轉染人Hela細胞,熒光顯微鏡下觀察有熒光蛋白的錶達.日本七鰓鰻pcna基因的真覈錶達載體成功構建和轉染,為探討七鰓鰻pcna基因功能研究及其它七鰓鰻相關研究提供條件.
증식세포핵항원(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),야칭주기단백혹DNA취합매적보조단백,시진핵세포합성소필수적핵단백,재DNA복제중기중요작용.전기실험발현일본칠새만간장cDNA문고적표체서렬표첨(Expressed Sequence Tag, EST)중존재여고등척추동물pcna기인동원적서렬.제취일본칠새만(Lampetra japonica)간장조직RNA,통과RT-PCR방법확증칠새만pcna기인,대기진행생물신식학분석,병장Lj-pcna기인성공구건도pGFP-N2진핵표체재체상,중조질립PGFP-N2-Lj-pcna전염인Hela세포,형광현미경하관찰유형광단백적표체.일본칠새만pcna기인적진핵표체재체성공구건화전염,위탐토칠새만pcna기인공능연구급기타칠새만상관연구제공조건.