黑龙江农业科学
黑龍江農業科學
흑룡강농업과학
HEILONGJINAG AGRICULTURAL SCIENCE
2012年
12期
15-19
,共5页
崔继哲%乔磊%弭晓菊%付寅生%李想%杨慧
崔繼哲%喬磊%弭曉菊%付寅生%李想%楊慧
최계철%교뢰%미효국%부인생%리상%양혜
矮牵牛%TvNHX1基因%遗传转化
矮牽牛%TvNHX1基因%遺傳轉化
왜견우%TvNHX1기인%유전전화
为获得耐盐碱特性的矮牵牛新种质,提高其在广大盐碱地区的适应性,以矮牵牛品种梦幻兰和利宝紫为试材,简要介绍了TvNHX1基因的植物表达载体构建及用农杆菌介导法将TvNHX1基因转化矮牵牛的初步结果,并分析了6-BA和NAA组合对矮牵牛叶片分化的影响.结果表明:对PCR筛选得到的阳性菌落摇菌、提取质粒后进行BamHI/SacI双酶切鉴定,在1640bp左右得到了单一条带,与预期一致.证明pBI121-TvNHX1构建成功;在不同浓度激素组合的培养基中,梦幻兰的分化率都高于利宝紫,梦幻兰品种在6-BA为2.0mg·L-1、NAA为0.2mg·L-1时分化率达90.69%;以梦幻兰品种的叶片为外植体诱导生根,得到12株在筛选培养基上正常生根的矮牵牛苗,以TvNHX1基因特异引物 WFF和JWR1对获得的Kan抗性植株和非转基因对照进行PCR检测,12个抗性植株中7株扩增出特异的条带,说明TvNHX1基因已转入矮牵牛.
為穫得耐鹽堿特性的矮牽牛新種質,提高其在廣大鹽堿地區的適應性,以矮牽牛品種夢幻蘭和利寶紫為試材,簡要介紹瞭TvNHX1基因的植物錶達載體構建及用農桿菌介導法將TvNHX1基因轉化矮牽牛的初步結果,併分析瞭6-BA和NAA組閤對矮牽牛葉片分化的影響.結果錶明:對PCR篩選得到的暘性菌落搖菌、提取質粒後進行BamHI/SacI雙酶切鑒定,在1640bp左右得到瞭單一條帶,與預期一緻.證明pBI121-TvNHX1構建成功;在不同濃度激素組閤的培養基中,夢幻蘭的分化率都高于利寶紫,夢幻蘭品種在6-BA為2.0mg·L-1、NAA為0.2mg·L-1時分化率達90.69%;以夢幻蘭品種的葉片為外植體誘導生根,得到12株在篩選培養基上正常生根的矮牽牛苗,以TvNHX1基因特異引物 WFF和JWR1對穫得的Kan抗性植株和非轉基因對照進行PCR檢測,12箇抗性植株中7株擴增齣特異的條帶,說明TvNHX1基因已轉入矮牽牛.
위획득내염감특성적왜견우신충질,제고기재엄대염감지구적괄응성,이왜견우품충몽환란화리보자위시재,간요개소료TvNHX1기인적식물표체재체구건급용농간균개도법장TvNHX1기인전화왜견우적초보결과,병분석료6-BA화NAA조합대왜견우협편분화적영향.결과표명:대PCR사선득도적양성균락요균、제취질립후진행BamHI/SacI쌍매절감정,재1640bp좌우득도료단일조대,여예기일치.증명pBI121-TvNHX1구건성공;재불동농도격소조합적배양기중,몽환란적분화솔도고우리보자,몽환란품충재6-BA위2.0mg·L-1、NAA위0.2mg·L-1시분화솔체90.69%;이몽환란품충적협편위외식체유도생근,득도12주재사선배양기상정상생근적왜견우묘,이TvNHX1기인특이인물 WFF화JWR1대획득적Kan항성식주화비전기인대조진행PCR검측,12개항성식주중7주확증출특이적조대,설명TvNHX1기인이전입왜견우.
