天津科技大学学报
天津科技大學學報
천진과기대학학보
JOURNAL OF TIANJIN UNIVERSITY OF SCIENCE & TECHNOLOGY
2012年
5期
1-6
,共6页
徐庆阳%孙家凯%谢希贤%陈宁
徐慶暘%孫傢凱%謝希賢%陳寧
서경양%손가개%사희현%진저
L－异亮氨酸%高丝氨酸脱水酶%过表达%谷氨酸棒杆菌
L－異亮氨痠%高絲氨痠脫水酶%過錶達%穀氨痠棒桿菌
L－이량안산%고사안산탈수매%과표체%곡안산봉간균
谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中 hom 基因编码的高丝氨酸脱水酶为 L–异亮氨酸合成过程的关键酶,本研究通过在L–异亮氨酸生产菌C. glutamicum YILW中过表达高丝氨酸脱水酶,考察过表达高丝氨酸脱水酶对发酵L–异亮氨酸产量的影响.以L–异亮氨酸生产菌 C. glutamicum YILW 基因组为模板克隆hom 基因,将hom基因与表达载体 pXMJ19连接构建出重组质粒 pXMJ19-hom,再转入 C. glutamicum YILW 构建 C. glutamicum YILW(pXMJ19-hom).通过5,L 罐发酵研究重组质粒对工程菌的生长、耗糖、L–异亮氨酸产量及副产物积累等方面的影响.结果显示,重组酶的表达使菌株对 L–苏氨酸的抗反馈抑制作用得到加强.最终 L–异亮氨酸和 L–蛋氨酸积累量分别为36.5,g/L 和2.8,g/L,分别较出发菌株提高7%和33%,同时 L–赖氨酸合成量仅为2.1,g/L,较出发菌株降低了63.8%.
穀氨痠棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)中 hom 基因編碼的高絲氨痠脫水酶為 L–異亮氨痠閤成過程的關鍵酶,本研究通過在L–異亮氨痠生產菌C. glutamicum YILW中過錶達高絲氨痠脫水酶,攷察過錶達高絲氨痠脫水酶對髮酵L–異亮氨痠產量的影響.以L–異亮氨痠生產菌 C. glutamicum YILW 基因組為模闆剋隆hom 基因,將hom基因與錶達載體 pXMJ19連接構建齣重組質粒 pXMJ19-hom,再轉入 C. glutamicum YILW 構建 C. glutamicum YILW(pXMJ19-hom).通過5,L 罐髮酵研究重組質粒對工程菌的生長、耗糖、L–異亮氨痠產量及副產物積纍等方麵的影響.結果顯示,重組酶的錶達使菌株對 L–囌氨痠的抗反饋抑製作用得到加彊.最終 L–異亮氨痠和 L–蛋氨痠積纍量分彆為36.5,g/L 和2.8,g/L,分彆較齣髮菌株提高7%和33%,同時 L–賴氨痠閤成量僅為2.1,g/L,較齣髮菌株降低瞭63.8%.
곡안산봉간균(Corynebacterium glutamicum)중 hom 기인편마적고사안산탈수매위 L–이량안산합성과정적관건매,본연구통과재L–이량안산생산균C. glutamicum YILW중과표체고사안산탈수매,고찰과표체고사안산탈수매대발효L–이량안산산량적영향.이L–이량안산생산균 C. glutamicum YILW 기인조위모판극륭hom 기인,장hom기인여표체재체 pXMJ19련접구건출중조질립 pXMJ19-hom,재전입 C. glutamicum YILW 구건 C. glutamicum YILW(pXMJ19-hom).통과5,L 관발효연구중조질립대공정균적생장、모당、L–이량안산산량급부산물적루등방면적영향.결과현시,중조매적표체사균주대 L–소안산적항반궤억제작용득도가강.최종 L–이량안산화 L–단안산적루량분별위36.5,g/L 화2.8,g/L,분별교출발균주제고7%화33%,동시 L–뢰안산합성량부위2.1,g/L,교출발균주강저료63.8%.
