江西师范大学学报（自然科学版）
江西師範大學學報（自然科學版）
강서사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF JIANGXI NORMAL UNIVERSITY（NATURAL SCIENCES EDITION）
2012年
4期
425-430
,共6页
罗伟芝%符春荣%邬玉兰%陈献雄%刘志刚%黄海珍*
囉偉芝%符春榮%鄔玉蘭%陳獻雄%劉誌剛%黃海珍*
라위지%부춘영%오옥란%진헌웅%류지강%황해진*
罗氏沼虾%原肌球蛋白%变应原%克隆和表达
囉氏沼蝦%原肌毬蛋白%變應原%剋隆和錶達
라씨소하%원기구단백%변응원%극륭화표체
通过NCBI查找到罗氏沼虾原肌球蛋白的mRNA,根据其CDS区域设计特异引物,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体 pET-28a 上,转化到 E. coli BL21(DE3)和E. coli Rosatta后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化.采用免疫印迹检测其与对虾过敏患者血清的 IgE 结合活性.对罗氏沼虾变应原进行了表达、鉴定及纯化,成功地获得了具有变应原活性的重组罗氏沼虾原肌球蛋白,为罗氏沼虾过敏性疾病的诊断、治疗奠定了基础.
通過NCBI查找到囉氏沼蝦原肌毬蛋白的mRNA,根據其CDS區域設計特異引物,通過反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)剋隆齣目的基因片段,測序後將該片段剋隆到原覈錶達載體 pET-28a 上,轉化到 E. coli BL21(DE3)和E. coli Rosatta後,經異丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)誘導錶達,用Ni2+親和層析柱對重組變應原進行純化.採用免疫印跡檢測其與對蝦過敏患者血清的 IgE 結閤活性.對囉氏沼蝦變應原進行瞭錶達、鑒定及純化,成功地穫得瞭具有變應原活性的重組囉氏沼蝦原肌毬蛋白,為囉氏沼蝦過敏性疾病的診斷、治療奠定瞭基礎.
통과NCBI사조도라씨소하원기구단백적mRNA,근거기CDS구역설계특이인물,통과반전록취합매련반응(RT-PCR)극륭출목적기인편단,측서후장해편단극륭도원핵표체재체 pET-28a 상,전화도 E. coli BL21(DE3)화E. coli Rosatta후,경이병기-B-D-류대유당감(IPTG)유도표체,용Ni2+친화층석주대중조변응원진행순화.채용면역인적검측기여대하과민환자혈청적 IgE 결합활성.대라씨소하변응원진행료표체、감정급순화,성공지획득료구유변응원활성적중조라씨소하원기구단백,위라씨소하과민성질병적진단、치료전정료기출.
