中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
32期
5953-5958
,共6页
朱寅%徐卫袁%王文加%张兴祥%严飞%沙卫平%朱现玮
硃寅%徐衛袁%王文加%張興祥%嚴飛%沙衛平%硃現瑋
주인%서위원%왕문가%장흥상%엄비%사위평%주현위
脂肪来源间充质干细胞%成骨细胞%软骨细胞%多向分化%骨桥蛋白%Ⅱ型胶原%干细胞
脂肪來源間充質榦細胞%成骨細胞%軟骨細胞%多嚮分化%骨橋蛋白%Ⅱ型膠原%榦細胞
지방래원간충질간세포%성골세포%연골세포%다향분화%골교단백%Ⅱ형효원%간세포
背景:人脂肪来源间充质干细胞是种具有较强的体外增殖和多系分化能力的成体干细胞,可以从美容吸脂手术中获得,取材方便,原料来源丰富,在生物治疗应用方面蕴藏着巨大的价值.
目的:体外分离、培养人脂肪来源间充质干细胞,探讨其基本生物学特性及成骨成软骨的潜能.
方法:取美容吸脂获得的脂肪组织,采用Ⅱ型胶原酶消化法分离人脂肪来源间充质干细胞并进行体外培养;观察细胞形态、测定细胞周期、流式细胞仪鉴定细胞表面标志;取第3代细胞,分别加入成骨诱导培养基及成软骨诱导培养基行体外成骨及成软骨诱导.
结果与结论:体外培养人脂肪来源间充质干细胞呈纤维样形态,原代细胞24 h 内贴壁,培养5~7 d 后开始形成细胞集落;经细胞周期检测显示 G0/G1,S 和 G2/M 所占比例分别为(88±2)%,(12±2)%和0.03%.经流式细胞仪检测CD29和 CD105呈阳性表达,CD34和 CD45呈阴性表达.RT-PCR 检测显示,人脂肪间充质干细胞经成骨诱导分化后细胞中骨桥蛋白 mRNA 呈阳性表达,经软骨诱导分化后细胞中Ⅱ型胶原 mRNA 呈阳性表达.结果证实,实验成功体外分离、培养人脂肪来源间充质干细胞,其具有向成骨细胞和软骨细胞分化的潜能.
揹景:人脂肪來源間充質榦細胞是種具有較彊的體外增殖和多繫分化能力的成體榦細胞,可以從美容吸脂手術中穫得,取材方便,原料來源豐富,在生物治療應用方麵蘊藏著巨大的價值.
目的:體外分離、培養人脂肪來源間充質榦細胞,探討其基本生物學特性及成骨成軟骨的潛能.
方法:取美容吸脂穫得的脂肪組織,採用Ⅱ型膠原酶消化法分離人脂肪來源間充質榦細胞併進行體外培養;觀察細胞形態、測定細胞週期、流式細胞儀鑒定細胞錶麵標誌;取第3代細胞,分彆加入成骨誘導培養基及成軟骨誘導培養基行體外成骨及成軟骨誘導.
結果與結論:體外培養人脂肪來源間充質榦細胞呈纖維樣形態,原代細胞24 h 內貼壁,培養5~7 d 後開始形成細胞集落;經細胞週期檢測顯示 G0/G1,S 和 G2/M 所佔比例分彆為(88±2)%,(12±2)%和0.03%.經流式細胞儀檢測CD29和 CD105呈暘性錶達,CD34和 CD45呈陰性錶達.RT-PCR 檢測顯示,人脂肪間充質榦細胞經成骨誘導分化後細胞中骨橋蛋白 mRNA 呈暘性錶達,經軟骨誘導分化後細胞中Ⅱ型膠原 mRNA 呈暘性錶達.結果證實,實驗成功體外分離、培養人脂肪來源間充質榦細胞,其具有嚮成骨細胞和軟骨細胞分化的潛能.
배경:인지방래원간충질간세포시충구유교강적체외증식화다계분화능력적성체간세포,가이종미용흡지수술중획득,취재방편,원료래원봉부,재생물치료응용방면온장착거대적개치.
목적:체외분리、배양인지방래원간충질간세포,탐토기기본생물학특성급성골성연골적잠능.
방법:취미용흡지획득적지방조직,채용Ⅱ형효원매소화법분리인지방래원간충질간세포병진행체외배양;관찰세포형태、측정세포주기、류식세포의감정세포표면표지;취제3대세포,분별가입성골유도배양기급성연골유도배양기행체외성골급성연골유도.
결과여결론:체외배양인지방래원간충질간세포정섬유양형태,원대세포24 h 내첩벽,배양5~7 d 후개시형성세포집락;경세포주기검측현시 G0/G1,S 화 G2/M 소점비례분별위(88±2)%,(12±2)%화0.03%.경류식세포의검측CD29화 CD105정양성표체,CD34화 CD45정음성표체.RT-PCR 검측현시,인지방간충질간세포경성골유도분화후세포중골교단백 mRNA 정양성표체,경연골유도분화후세포중Ⅱ형효원 mRNA 정양성표체.결과증실,실험성공체외분리、배양인지방래원간충질간세포,기구유향성골세포화연골세포분화적잠능.
