中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
32期
5967-5972
,共6页
史筱璐%李化静%马艳%毕晓娟%谢凤莲%王鲁香%刘立中
史篠璐%李化靜%馬豔%畢曉娟%謝鳳蓮%王魯香%劉立中
사소로%리화정%마염%필효연%사봉련%왕로향%류립중
胚胎干细胞%成骨细胞%时段性%诱导分化%纳米羟基磷灰石%干细胞
胚胎榦細胞%成骨細胞%時段性%誘導分化%納米羥基燐灰石%榦細胞
배태간세포%성골세포%시단성%유도분화%납미간기린회석%간세포
背景:纳米羟基磷灰石具有良好的生物活性和相容性,在体外可与细胞短时间内形成紧密结合,是骨组织工程可植入性的材料.
目的:观察小鼠胚胎干细胞分化为成骨样时段性细胞的形态学特点.
方法:取 C57小鼠胚胎干细胞进行培养,将 P3胚胎干细胞制备拟胚体.通过碱性磷酸酶、免疫组织化学 OCT-4、SOX2、NANOG 对原代胚胎干细胞进行鉴定;通过茜素红 S、Ⅰ型胶原、冯库萨染色对成骨诱导后的细胞(L-维生素 C、β-磷酸甘油、地塞米松)进行检测;扫描电镜观察与纳米羟基磷灰石材料复合培养时细胞的形态及增殖情况.
结果与结论:拟胚体贴壁后7 d,各组碱性磷酸酶表达即发生变化,14 d 后碱性磷酸酶表达逐渐增加,光镜下可见轮廓清晰大小不等的绿色结节.茜素红 S 染色镜下可见橙红色、边界清晰和直径大小不等的结节.冯库萨染色14 d可见细胞团内有黑色沉淀,21 d 后黑色沉淀面积增大.胚胎干细胞与纳米羟基磷灰石材料体外复合培养1,3,5,7,10 d,细胞大部分呈细胞团样生长.提示在维生素 C、β-磷酸甘油、地塞米松共同作用下,有效促进了胚胎干细胞成骨细胞的产生,胚胎干细胞与支架材料复合培养结合程度高,可用来构建组织工程骨.
揹景:納米羥基燐灰石具有良好的生物活性和相容性,在體外可與細胞短時間內形成緊密結閤,是骨組織工程可植入性的材料.
目的:觀察小鼠胚胎榦細胞分化為成骨樣時段性細胞的形態學特點.
方法:取 C57小鼠胚胎榦細胞進行培養,將 P3胚胎榦細胞製備擬胚體.通過堿性燐痠酶、免疫組織化學 OCT-4、SOX2、NANOG 對原代胚胎榦細胞進行鑒定;通過茜素紅 S、Ⅰ型膠原、馮庫薩染色對成骨誘導後的細胞(L-維生素 C、β-燐痠甘油、地塞米鬆)進行檢測;掃描電鏡觀察與納米羥基燐灰石材料複閤培養時細胞的形態及增殖情況.
結果與結論:擬胚體貼壁後7 d,各組堿性燐痠酶錶達即髮生變化,14 d 後堿性燐痠酶錶達逐漸增加,光鏡下可見輪廓清晰大小不等的綠色結節.茜素紅 S 染色鏡下可見橙紅色、邊界清晰和直徑大小不等的結節.馮庫薩染色14 d可見細胞糰內有黑色沉澱,21 d 後黑色沉澱麵積增大.胚胎榦細胞與納米羥基燐灰石材料體外複閤培養1,3,5,7,10 d,細胞大部分呈細胞糰樣生長.提示在維生素 C、β-燐痠甘油、地塞米鬆共同作用下,有效促進瞭胚胎榦細胞成骨細胞的產生,胚胎榦細胞與支架材料複閤培養結閤程度高,可用來構建組織工程骨.
배경:납미간기린회석구유량호적생물활성화상용성,재체외가여세포단시간내형성긴밀결합,시골조직공정가식입성적재료.
목적:관찰소서배태간세포분화위성골양시단성세포적형태학특점.
방법:취 C57소서배태간세포진행배양,장 P3배태간세포제비의배체.통과감성린산매、면역조직화학 OCT-4、SOX2、NANOG 대원대배태간세포진행감정;통과천소홍 S、Ⅰ형효원、풍고살염색대성골유도후적세포(L-유생소 C、β-린산감유、지새미송)진행검측;소묘전경관찰여납미간기린회석재료복합배양시세포적형태급증식정황.
결과여결론:의배체첩벽후7 d,각조감성린산매표체즉발생변화,14 d 후감성린산매표체축점증가,광경하가견륜곽청석대소불등적록색결절.천소홍 S 염색경하가견등홍색、변계청석화직경대소불등적결절.풍고살염색14 d가견세포단내유흑색침정,21 d 후흑색침정면적증대.배태간세포여납미간기린회석재료체외복합배양1,3,5,7,10 d,세포대부분정세포단양생장.제시재유생소 C、β-린산감유、지새미송공동작용하,유효촉진료배태간세포성골세포적산생,배태간세포여지가재료복합배양결합정도고,가용래구건조직공정골.
