中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
36期
6651-6657
,共7页
刘傥%张湘生%张庆%雷霆%熊光仲
劉儻%張湘生%張慶%雷霆%熊光仲
류당%장상생%장경%뢰정%웅광중
骨髓间充质干细胞%组织工程%骨形态发生蛋白2%血管内皮细胞生长因子%成骨分化%干细胞
骨髓間充質榦細胞%組織工程%骨形態髮生蛋白2%血管內皮細胞生長因子%成骨分化%榦細胞
골수간충질간세포%조직공정%골형태발생단백2%혈관내피세포생장인자%성골분화%간세포
背景:有研究表明血管内皮生长因子可促进内皮细胞增殖、分化和迁移,而骨髓间充质干细胞经诱导分化后细胞自身的血管内皮细胞生长因子及骨形态发生蛋白2如何表达,却鲜见报道.
目的:观察兔骨髓间充质干细胞成骨诱导分化过程中血管内皮细胞生长因子和骨形态发生蛋白2的表达.
方法:取第3代新西兰大白兔骨髓间充质干细胞,1 d后将细胞分为两组:对照组不更换培养基;诱导组加入成骨诱导培养基进行成骨诱导,流式细胞仪检测其表面抗原.RT-PCR和Western-Blot检测细胞成骨分化过程中血管内皮细胞生长因子和骨形态发生蛋白2的表达.
结果与结论:兔骨髓间充质干细胞成骨诱导后,细胞形态由长梭形逐渐变为短梭形,多角形,最后成集落层叠生长;在诱导过程中,碱性磷酸酶活性逐渐增高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);诱导7 d时Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色、14时骨钙素免疫细胞化学染色、21 d时钙化结节染色阳性;RT-PCR和Western-Blot结果显示两组均有骨形态发生蛋白2和血管内皮细胞生长因子表达,诱导后第7,14,21天表达比较,差异有显著性意义(P<0.05),第7天,两者表达最强.说明兔骨髓间充质干细胞分离、提取操作简便易行,且有较强的生长增殖能力,可诱导分化为成骨细胞.其在成骨诱导过程中,骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子表达均先增强后减弱,血管内皮细胞生长因子表达可能对血管生成有促进作用.
揹景:有研究錶明血管內皮生長因子可促進內皮細胞增殖、分化和遷移,而骨髓間充質榦細胞經誘導分化後細胞自身的血管內皮細胞生長因子及骨形態髮生蛋白2如何錶達,卻鮮見報道.
目的:觀察兔骨髓間充質榦細胞成骨誘導分化過程中血管內皮細胞生長因子和骨形態髮生蛋白2的錶達.
方法:取第3代新西蘭大白兔骨髓間充質榦細胞,1 d後將細胞分為兩組:對照組不更換培養基;誘導組加入成骨誘導培養基進行成骨誘導,流式細胞儀檢測其錶麵抗原.RT-PCR和Western-Blot檢測細胞成骨分化過程中血管內皮細胞生長因子和骨形態髮生蛋白2的錶達.
結果與結論:兔骨髓間充質榦細胞成骨誘導後,細胞形態由長梭形逐漸變為短梭形,多角形,最後成集落層疊生長;在誘導過程中,堿性燐痠酶活性逐漸增高,與對照組比較有顯著性差異(P<0.05);誘導7 d時Ⅰ型膠原免疫細胞化學染色、14時骨鈣素免疫細胞化學染色、21 d時鈣化結節染色暘性;RT-PCR和Western-Blot結果顯示兩組均有骨形態髮生蛋白2和血管內皮細胞生長因子錶達,誘導後第7,14,21天錶達比較,差異有顯著性意義(P<0.05),第7天,兩者錶達最彊.說明兔骨髓間充質榦細胞分離、提取操作簡便易行,且有較彊的生長增殖能力,可誘導分化為成骨細胞.其在成骨誘導過程中,骨形態髮生蛋白2和血管內皮生長因子錶達均先增彊後減弱,血管內皮細胞生長因子錶達可能對血管生成有促進作用.
배경:유연구표명혈관내피생장인자가촉진내피세포증식、분화화천이,이골수간충질간세포경유도분화후세포자신적혈관내피세포생장인자급골형태발생단백2여하표체,각선견보도.
목적:관찰토골수간충질간세포성골유도분화과정중혈관내피세포생장인자화골형태발생단백2적표체.
방법:취제3대신서란대백토골수간충질간세포,1 d후장세포분위량조:대조조불경환배양기;유도조가입성골유도배양기진행성골유도,류식세포의검측기표면항원.RT-PCR화Western-Blot검측세포성골분화과정중혈관내피세포생장인자화골형태발생단백2적표체.
결과여결론:토골수간충질간세포성골유도후,세포형태유장사형축점변위단사형,다각형,최후성집락층첩생장;재유도과정중,감성린산매활성축점증고,여대조조비교유현저성차이(P<0.05);유도7 d시Ⅰ형효원면역세포화학염색、14시골개소면역세포화학염색、21 d시개화결절염색양성;RT-PCR화Western-Blot결과현시량조균유골형태발생단백2화혈관내피세포생장인자표체,유도후제7,14,21천표체비교,차이유현저성의의(P<0.05),제7천,량자표체최강.설명토골수간충질간세포분리、제취조작간편역행,차유교강적생장증식능력,가유도분화위성골세포.기재성골유도과정중,골형태발생단백2화혈관내피생장인자표체균선증강후감약,혈관내피세포생장인자표체가능대혈관생성유촉진작용.