中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
36期
6685-6689
,共5页
张君红%姜海行%覃山羽%孟云超%宁琳
張君紅%薑海行%覃山羽%孟雲超%寧琳
장군홍%강해행%담산우%맹운초%저림
骨髓间充质干细胞%全骨髓贴壁法%成骨分化%成脂分化%生物学特征%表面抗原%生长曲线%细胞形态
骨髓間充質榦細胞%全骨髓貼壁法%成骨分化%成脂分化%生物學特徵%錶麵抗原%生長麯線%細胞形態
골수간충질간세포%전골수첩벽법%성골분화%성지분화%생물학특정%표면항원%생장곡선%세포형태
背景:分离培养纯度较高的骨髓间充质干细胞是对其进行深入研究的前提.
目的:观察全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特征.
方法:选取体质量为80-100 g雄性SD大鼠,采用全骨髓细胞贴壁培养法获取骨髓间充质干细胞.在取材过程中需严格掌握大鼠处死至将细胞悬液放入培养箱内的时间,一般控制在40 min以内.使用基础培养基冲洗骨髓腔时力度适中且在骨髓腔内旋转数次,可使骨髓细胞充分脱落,保证骨髓细胞的获得量.
结果与结论:原代骨髓间充质干细胞为贴壁生长的成纤维样细胞,传代后的细胞形态均一,呈漩涡状排列;第3代骨髓间充质干细胞的生长曲线呈S形,经历3个生长时期:潜伏期、对数生长期和停滞期;流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面抗原结果示:CD29+99.45%、CD34+1.45%、CD44+99.52%、CD45+1.41%;成骨、成脂诱导分化后,矿化结节被茜素红染成橘红色,脂滴被油红O染成红色.说明骨髓间充质干细胞能向成骨、成脂分化,具有多向分化潜能,符合国际细胞治疗学会间充质及组织干细胞委员会提出的鉴定动物来源骨髓间充质干细胞的最低标准.
揹景:分離培養純度較高的骨髓間充質榦細胞是對其進行深入研究的前提.
目的:觀察全骨髓貼壁法分離培養大鼠骨髓間充質榦細胞的生物學特徵.
方法:選取體質量為80-100 g雄性SD大鼠,採用全骨髓細胞貼壁培養法穫取骨髓間充質榦細胞.在取材過程中需嚴格掌握大鼠處死至將細胞懸液放入培養箱內的時間,一般控製在40 min以內.使用基礎培養基遲洗骨髓腔時力度適中且在骨髓腔內鏇轉數次,可使骨髓細胞充分脫落,保證骨髓細胞的穫得量.
結果與結論:原代骨髓間充質榦細胞為貼壁生長的成纖維樣細胞,傳代後的細胞形態均一,呈漩渦狀排列;第3代骨髓間充質榦細胞的生長麯線呈S形,經歷3箇生長時期:潛伏期、對數生長期和停滯期;流式細胞儀檢測骨髓間充質榦細胞錶麵抗原結果示:CD29+99.45%、CD34+1.45%、CD44+99.52%、CD45+1.41%;成骨、成脂誘導分化後,礦化結節被茜素紅染成橘紅色,脂滴被油紅O染成紅色.說明骨髓間充質榦細胞能嚮成骨、成脂分化,具有多嚮分化潛能,符閤國際細胞治療學會間充質及組織榦細胞委員會提齣的鑒定動物來源骨髓間充質榦細胞的最低標準.
배경:분리배양순도교고적골수간충질간세포시대기진행심입연구적전제.
목적:관찰전골수첩벽법분리배양대서골수간충질간세포적생물학특정.
방법:선취체질량위80-100 g웅성SD대서,채용전골수세포첩벽배양법획취골수간충질간세포.재취재과정중수엄격장악대서처사지장세포현액방입배양상내적시간,일반공제재40 min이내.사용기출배양기충세골수강시력도괄중차재골수강내선전수차,가사골수세포충분탈락,보증골수세포적획득량.
결과여결론:원대골수간충질간세포위첩벽생장적성섬유양세포,전대후적세포형태균일,정선와상배렬;제3대골수간충질간세포적생장곡선정S형,경력3개생장시기:잠복기、대수생장기화정체기;류식세포의검측골수간충질간세포표면항원결과시:CD29+99.45%、CD34+1.45%、CD44+99.52%、CD45+1.41%;성골、성지유도분화후,광화결절피천소홍염성귤홍색,지적피유홍O염성홍색.설명골수간충질간세포능향성골、성지분화,구유다향분화잠능,부합국제세포치료학회간충질급조직간세포위원회제출적감정동물래원골수간충질간세포적최저표준.
