中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
36期
6762-6766
,共5页
刘俊峰%杜忠东%陈植%关云谦%李慎涛
劉俊峰%杜忠東%陳植%關雲謙%李慎濤
류준봉%두충동%진식%관운겸%리신도
骨髓%内皮祖细胞%小鼠%扩增%单个核细胞
骨髓%內皮祖細胞%小鼠%擴增%單箇覈細胞
골수%내피조세포%소서%확증%단개핵세포
背景:对于小型实验动物,通过分离骨髓单个核细胞进行内皮祖细胞培养、扩增的方法较为繁琐.目的:探讨采用全骨髓培养方式扩增小型动物内皮祖细胞的可行性.
方法:采用全骨髓培养分离C57BL/6小鼠内皮祖细胞,培养第7天行DiL-acLDL和FITC-UEA-1双荧光染色检测,并利用流式细胞仪检测其CD34、FLK-1表达情况.同时检测其体外血管生成能力,黏附、增殖和迁移能力.设立骨髓单个核细胞培养法为对照.
结果与结论:全骨髓培养至第2天便可见早期内皮祖细胞集落形成,第7天时可见大量短梭状内皮祖细胞,其具有吞噬DiL-acLDL及结合FITC-UEA-1的能力,内皮祖细胞在基质胶上同样能够形成血管样结构,培养至第2周晚期内皮祖细胞集落出现,迅速生长形成典型的铺路石样,并能够在体外传代培养,细胞数量、细胞表面CD34、FLK-1表达、体外黏附、增殖和迁移能力及晚期集落出现时间与对照组差异无显著性意义(P>0.05).说明采用全骨髓培养的方式能够实现小型动物内皮祖细胞的筛选扩增,且操作简便.
揹景:對于小型實驗動物,通過分離骨髓單箇覈細胞進行內皮祖細胞培養、擴增的方法較為繁瑣.目的:探討採用全骨髓培養方式擴增小型動物內皮祖細胞的可行性.
方法:採用全骨髓培養分離C57BL/6小鼠內皮祖細胞,培養第7天行DiL-acLDL和FITC-UEA-1雙熒光染色檢測,併利用流式細胞儀檢測其CD34、FLK-1錶達情況.同時檢測其體外血管生成能力,黏附、增殖和遷移能力.設立骨髓單箇覈細胞培養法為對照.
結果與結論:全骨髓培養至第2天便可見早期內皮祖細胞集落形成,第7天時可見大量短梭狀內皮祖細胞,其具有吞噬DiL-acLDL及結閤FITC-UEA-1的能力,內皮祖細胞在基質膠上同樣能夠形成血管樣結構,培養至第2週晚期內皮祖細胞集落齣現,迅速生長形成典型的鋪路石樣,併能夠在體外傳代培養,細胞數量、細胞錶麵CD34、FLK-1錶達、體外黏附、增殖和遷移能力及晚期集落齣現時間與對照組差異無顯著性意義(P>0.05).說明採用全骨髓培養的方式能夠實現小型動物內皮祖細胞的篩選擴增,且操作簡便.
배경:대우소형실험동물,통과분리골수단개핵세포진행내피조세포배양、확증적방법교위번쇄.목적:탐토채용전골수배양방식확증소형동물내피조세포적가행성.
방법:채용전골수배양분리C57BL/6소서내피조세포,배양제7천행DiL-acLDL화FITC-UEA-1쌍형광염색검측,병이용류식세포의검측기CD34、FLK-1표체정황.동시검측기체외혈관생성능력,점부、증식화천이능력.설립골수단개핵세포배양법위대조.
결과여결론:전골수배양지제2천편가견조기내피조세포집락형성,제7천시가견대량단사상내피조세포,기구유탄서DiL-acLDL급결합FITC-UEA-1적능력,내피조세포재기질효상동양능구형성혈관양결구,배양지제2주만기내피조세포집락출현,신속생장형성전형적포로석양,병능구재체외전대배양,세포수량、세포표면CD34、FLK-1표체、체외점부、증식화천이능력급만기집락출현시간여대조조차이무현저성의의(P>0.05).설명채용전골수배양적방식능구실현소형동물내피조세포적사선확증,차조작간편.
