亚热带植物科学
亞熱帶植物科學
아열대식물과학
SUBTROPICAL PLANT SCIENCE
2012年
3期
21-24
,共4页
李达%张宏志%龙岳林%蒋露%陈己任%黄笛%吕长平
李達%張宏誌%龍嶽林%蔣露%陳己任%黃笛%呂長平
리체%장굉지%룡악림%장로%진기임%황적%려장평
兰属%DNA%模板%SRAP-PCR%反应体系%优化
蘭屬%DNA%模闆%SRAP-PCR%反應體繫%優化
란속%DNA%모판%SRAP-PCR%반응체계%우화
为获得兰属清晰的 SRAP 标记图谱,对兰属 SRAP-PCR 反应体系进行了初步探讨,建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的 SRAP-PCR 反应体系.最佳反应体系:在30μL 反应总体系中,Mg2+2.2 mmol/L、dNTPs 0.8 mmol/L、DNA 模板150 ng、DNA 聚合酶2.0 U,上、下游引物各1.5μmol/L;扩增程序:在94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min 的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高至55℃,最后72℃延伸5 min
為穫得蘭屬清晰的 SRAP 標記圖譜,對蘭屬 SRAP-PCR 反應體繫進行瞭初步探討,建立瞭擴增多態性高、重複性好、帶型清晰的 SRAP-PCR 反應體繫.最佳反應體繫:在30μL 反應總體繫中,Mg2+2.2 mmol/L、dNTPs 0.8 mmol/L、DNA 模闆150 ng、DNA 聚閤酶2.0 U,上、下遊引物各1.5μmol/L;擴增程序:在94℃預變性4 min,反應前5箇循環在94℃變性1 min、35℃複性1 min、72℃延伸1 min 的條件下運行,隨後的30箇循環複性溫度提高至55℃,最後72℃延伸5 min
위획득란속청석적 SRAP 표기도보,대란속 SRAP-PCR 반응체계진행료초보탐토,건립료확증다태성고、중복성호、대형청석적 SRAP-PCR 반응체계.최가반응체계:재30μL 반응총체계중,Mg2+2.2 mmol/L、dNTPs 0.8 mmol/L、DNA 모판150 ng、DNA 취합매2.0 U,상、하유인물각1.5μmol/L;확증정서:재94℃예변성4 min,반응전5개순배재94℃변성1 min、35℃복성1 min、72℃연신1 min 적조건하운행,수후적30개순배복성온도제고지55℃,최후72℃연신5 min
