CAJ | 학술논문

为研究圆环病毒病的流行情况及防治奠定基础,从湖北省某些大型养猪场采集临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)病死猪的淋巴结、脾等组织病料,进行病毒分离和鉴定.对分离病毒进行了间接免疫荧光鉴定、电子显微镜鉴定、核苷酸序列比对分析及动物感染试验;同时对病毒的培养条件进行优化,用RT-PCR检测感染细胞中的病毒核酸含量.结果表明,从猪病料中分离到1株猪圆环病毒2型(PCV2),命名为PCV2-WH.分离毒株经间接免疫荧光可检测到特异的PCV2荧光斑,电子显微镜下可观察到直径17 nm大小、圆形病毒粒子;利用一对圆环病毒2型ORF2基因引物进行了PCR扩增,将所得序列与GenBank收录的9株圆环病毒2型ORF2基因的核苷酸序列比对,同源性为98.2%~99.9%.非免疫猪接种出现明显的临床症状和病理变化.优化培养的结果显示,细胞与病毒同步接种培养24 h后,用300 mmol/L D-氨基葡萄糖于37℃作用30 min后继续培养48 h的病毒滴度最高.本研究为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、诊断及分子生物学等研究奠定了基础.
위연구원배병독병적류행정황급방치전정기출,종호북성모사대형양저장채집림상상표현위단내자저다계통쇠갈종합정(PMWS)병사저적림파결、비등조직병료,진행병독분리화감정.대분리병독진행료간접면역형광감정、전자현미경감정、핵감산서렬비대분석급동물감염시험;동시대병독적배양조건진행우화,용RT-PCR검측감염세포중적병독핵산함량.결과표명,종저병료중분리도1주저원배병독2형(PCV2),명명위PCV2-WH.분리독주경간접면역형광가검측도특이적PCV2형광반,전자현미경하가관찰도직경17 nm대소、원형병독입자;이용일대원배병독2형ORF2기인인물진행료PCR확증,장소득서렬여GenBank수록적9주원배병독2형ORF2기인적핵감산서렬비대,동원성위98.2%~99.9%.비면역저접충출현명현적림상증상화병리변화.우화배양적결과현시,세포여병독동보접충배양24 h후,용300 mmol/L D-안기포도당우37℃작용30 min후계속배양48 h적병독적도최고.본연구위진일보개전해병독적치병성、역묘면역、진단급분자생물학등연구전정료기출.