中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2012年
8期
40-42
,共3页
员丽娟%史茜%季新成%牛国辉
員麗娟%史茜%季新成%牛國輝
원려연%사천%계신성%우국휘
新孢子虫%Nc-5基因%荧光PCR
新孢子蟲%Nc-5基因%熒光PCR
신포자충%Nc-5기인%형광PCR
根据已知的犬新孢子虫种属特异性基因片段Nc-5基因序列,设计荧光定量PCR引物和荧光探针,经反应条件的优化,建立了检测新孢子虫的荧光定量PCR方法.该方法的检测灵敏度为10拷贝/反应.通过对系列稀释的重组质粒进行重复性检测,Ct值的变异系数为0.50%~1.18%.应用该方法对50份牛全血和8份流产胎儿样本进行检测,有5份全血和1份流产胎儿样本为阳性,阳性检出率均为10.3%,比普通PCR方法阳性检出率(7%)高.且具有较好的特异性和可重复性,可用来对新孢子虫病快速准确检测.
根據已知的犬新孢子蟲種屬特異性基因片段Nc-5基因序列,設計熒光定量PCR引物和熒光探針,經反應條件的優化,建立瞭檢測新孢子蟲的熒光定量PCR方法.該方法的檢測靈敏度為10拷貝/反應.通過對繫列稀釋的重組質粒進行重複性檢測,Ct值的變異繫數為0.50%~1.18%.應用該方法對50份牛全血和8份流產胎兒樣本進行檢測,有5份全血和1份流產胎兒樣本為暘性,暘性檢齣率均為10.3%,比普通PCR方法暘性檢齣率(7%)高.且具有較好的特異性和可重複性,可用來對新孢子蟲病快速準確檢測.
근거이지적견신포자충충속특이성기인편단Nc-5기인서렬,설계형광정량PCR인물화형광탐침,경반응조건적우화,건립료검측신포자충적형광정량PCR방법.해방법적검측령민도위10고패/반응.통과대계렬희석적중조질립진행중복성검측,Ct치적변이계수위0.50%~1.18%.응용해방법대50빈우전혈화8빈유산태인양본진행검측,유5빈전혈화1빈유산태인양본위양성,양성검출솔균위10.3%,비보통PCR방법양성검출솔(7%)고.차구유교호적특이성화가중복성,가용래대신포자충병쾌속준학검측.
