中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2012年
12期
23-25
,共3页
安元龙%吴斌%林长军%肇慧君
安元龍%吳斌%林長軍%肇慧君
안원룡%오빈%림장군%조혜군
病毒性出血性败血症病毒%荧光逆转录LAMP法%诊断
病毒性齣血性敗血癥病毒%熒光逆轉錄LAMP法%診斷
병독성출혈성패혈증병독%형광역전록LAMP법%진단
运用GenieII实时荧光等温扩增检测系统,以LAMP法荧光检测为基础,建立了对病毒性出血性败血症病毒进行荧光实时反转录环介导等温扩增检测方法.根据对VHSV病毒N基因序列的分析,针对病毒的高保守区域的6个特异性序列,设计了3对特异性引物,同时加入dsDNA混合染料,对核酸扩增过程进行实时荧光监控.该方法的特异性良好,与其他鱼类弹状病毒无交叉反应.敏感度高,检测限为20 fg RNA模板.实验结果表明该方法是一种操作简单、快速高效、高特异性高灵敏度的病毒检测方法.
運用GenieII實時熒光等溫擴增檢測繫統,以LAMP法熒光檢測為基礎,建立瞭對病毒性齣血性敗血癥病毒進行熒光實時反轉錄環介導等溫擴增檢測方法.根據對VHSV病毒N基因序列的分析,針對病毒的高保守區域的6箇特異性序列,設計瞭3對特異性引物,同時加入dsDNA混閤染料,對覈痠擴增過程進行實時熒光鑑控.該方法的特異性良好,與其他魚類彈狀病毒無交扠反應.敏感度高,檢測限為20 fg RNA模闆.實驗結果錶明該方法是一種操作簡單、快速高效、高特異性高靈敏度的病毒檢測方法.
운용GenieII실시형광등온확증검측계통,이LAMP법형광검측위기출,건립료대병독성출혈성패혈증병독진행형광실시반전록배개도등온확증검측방법.근거대VHSV병독N기인서렬적분석,침대병독적고보수구역적6개특이성서렬,설계료3대특이성인물,동시가입dsDNA혼합염료,대핵산확증과정진행실시형광감공.해방법적특이성량호,여기타어류탄상병독무교차반응.민감도고,검측한위20 fg RNA모판.실험결과표명해방법시일충조작간단、쾌속고효、고특이성고령민도적병독검측방법.
