CAJ | 학술논문

在实验室所构建的拟穴青蟹(Scylla paramamosain)EST 文库基础上筛选出泛素基因(Ubquitin, Sp-Ub)片段,利用RACE技术克隆其全长cDNA序列,并对其结构进行分析;利用实时定量PCR技术检测该基因在雌蟹各组织及性腺不同发育阶段中的表达情况.结果显示, Sp-Ub基因全长555 bp,编码154个氨基酸,其第1~76个氨基酸为高度保守的泛素结构域,第101~147的氨基酸残基为典型的核糖体蛋白S27a的保守区域;预测的泛素结构域二级结构由5个延伸链,1个α-螺旋及其连接的无规卷曲构成, Sp?Ub三维结构由1个α-螺旋以及5个β片层.多重比对表明不同物种的泛素结构域和核糖体蛋白S27a结构域在进化过程中高度保守.定量PCR结果显示, Sp-Ub在鳃中的表达水平最高,卵巢次之,各组织间的表达无显著性差异,说明Sp-Ub基因在各组织中的表达恒定,且具有普遍作用;在卵巢发育过程中, Sp-Ub在O5期的表达水平最高, O1、O4期次之, O2期表达量最低且与O5期具有显著差异(P<0.05);在精巢发育过程中, Sp-Ub在T2期的表达量最高,其次为T1期, T3期表达最低且与T2期具有显著差异(P<0.05).本研究结果说明了 Sp-Ub 对拟穴青蟹生殖细胞的生长和发育可能具有重要作用.本研究将为甲壳动物性腺发育调控的分子机制奠定基础.
재실험실소구건적의혈청해(Scylla paramamosain)EST 문고기출상사선출범소기인(Ubquitin, Sp-Ub)편단,이용RACE기술극륭기전장cDNA서렬,병대기결구진행분석;이용실시정량PCR기술검측해기인재자해각조직급성선불동발육계단중적표체정황.결과현시, Sp-Ub기인전장555 bp,편마154개안기산,기제1~76개안기산위고도보수적범소결구역,제101~147적안기산잔기위전형적핵당체단백S27a적보수구역;예측적범소결구역이급결구유5개연신련,1개α-라선급기련접적무규권곡구성, Sp?Ub삼유결구유1개α-라선이급5개β편층.다중비대표명불동물충적범소결구역화핵당체단백S27a결구역재진화과정중고도보수.정량PCR결과현시, Sp-Ub재새중적표체수평최고,란소차지,각조직간적표체무현저성차이,설명Sp-Ub기인재각조직중적표체항정,차구유보편작용;재란소발육과정중, Sp-Ub재O5기적표체수평최고, O1、O4기차지, O2기표체량최저차여O5기구유현저차이(P<0.05);재정소발육과정중, Sp-Ub재T2기적표체량최고,기차위T1기, T3기표체최저차여T2기구유현저차이(P<0.05).본연구결과설명료 Sp-Ub 대의혈청해생식세포적생장화발육가능구유중요작용.본연구장위갑각동물성선발육조공적분자궤제전정기출.