CAJ | 학술논문

目的本研究应用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)方法抑制COPS3基因表达,分析其对肺癌细胞增殖的影响并探讨其相关机制,以期初步阐明COPS3基因在肺癌发展中的作用.方法以肺癌细胞株A549为研究对象,分别将携带有COPS3基因siRNA (SmallinterferingRNA)序列的慢病毒载体(siCOPS3)和携有无关序列的对照载体感染A549细胞株,应用实时定量PCR(realtimePCR,RTPCR)和westernblot方法分析COPS3mRNA及蛋白表达水平;BrdU法分析细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化与细胞凋亡情况.结果成功构建了COPS3慢病毒RNAi载体,并成功感染A549细胞;与对照组相比,感染有siCOPS3的细胞COPS3mRNA及蛋白表达水平均显著下降,细胞增殖受抑制,细胞凋亡增加;大部分细胞周期滞于G0/G1期.结论下调COPS3基因水平可以抑制肺癌细胞增殖并促进其凋亡.COPS3慢病毒RNAi的建立为进一步研究COPS3的功能奠定了基础.
목적본연구응용RNA간우(RNAinterference,RNAi)방법억제COPS3기인표체,분석기대폐암세포증식적영향병탐토기상관궤제,이기초보천명COPS3기인재폐암발전중적작용.방법이폐암세포주A549위연구대상,분별장휴대유COPS3기인siRNA (SmallinterferingRNA)서렬적만병독재체(siCOPS3)화휴유무관서렬적대조재체감염A549세포주,응용실시정량PCR(realtimePCR,RTPCR)화westernblot방법분석COPS3mRNA급단백표체수평;BrdU법분석세포증식정황;류식세포술검측세포주기변화여세포조망정황.결과성공구건료COPS3만병독RNAi재체,병성공감염A549세포;여대조조상비,감염유siCOPS3적세포COPS3mRNA급단백표체수평균현저하강,세포증식수억제,세포조망증가;대부분세포주기체우G0/G1기.결론하조COPS3기인수평가이억제폐암세포증식병촉진기조망.COPS3만병독RNAi적건립위진일보연구COPS3적공능전정료기출.