中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2012年
10期
1770-1773
,共4页
罗雁非%丁旭%文雪%张晓静%李洪军%何成彦%赵丽纯
囉雁非%丁旭%文雪%張曉靜%李洪軍%何成彥%趙麗純
라안비%정욱%문설%장효정%리홍군%하성언%조려순
志贺氏菌%毒力基因%PCR
誌賀氏菌%毒力基因%PCR
지하씨균%독력기인%PCR
目的检测IPaH1基因在志贺氏菌特异性表达水平并对 PCR 条件进行优化.方法应用设计的针对IPaH1基因的特异性引物,通过 PCR 法检测IPaH1基因在鲍氏志贺氏菌、野生志贺氏菌、大肠埃希氏菌、出血性大肠埃希氏菌(O157:H7)、肠炎沙门氏菌、阪崎肠杆菌、普通变形杆菌、蜡样芽孢杆菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、单增生李斯特菌、副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌的表达水平,并对 PCR 反应中退火温度、最佳引物浓度等进行优化.结果①在志贺氏菌检测到IPaH1基因特异性表达,而大肠埃希氏菌、出血性大肠埃希氏菌(O157:H7)、肠炎沙门氏菌、阪崎肠杆菌、普通变形杆菌、蜡样芽孢杆菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、单增生李斯特菌、副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌未见表达;②PCR 法扩增志贺氏菌IPaH1基因时,第一对引物IPaH11的最适退火温度为55.0℃-59.0℃,第二对引物IPaH12为51.0℃-55.0℃;两对引物理想终浓度均为0.1μM.结论 IPaH1基因特异表达于志贺氏菌;应用设计的引物通过 PCR 法扩增志贺氏菌IPaH1基因的最适退火温度分别为55.0℃-59.0℃、51.0℃-55.0℃,最适引物终浓度均为0.1μM.
目的檢測IPaH1基因在誌賀氏菌特異性錶達水平併對 PCR 條件進行優化.方法應用設計的針對IPaH1基因的特異性引物,通過 PCR 法檢測IPaH1基因在鮑氏誌賀氏菌、野生誌賀氏菌、大腸埃希氏菌、齣血性大腸埃希氏菌(O157:H7)、腸炎沙門氏菌、阪崎腸桿菌、普通變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌、糞腸毬菌、金黃色葡萄毬菌、單增生李斯特菌、副溶血性弧菌、產氣莢膜梭菌的錶達水平,併對 PCR 反應中退火溫度、最佳引物濃度等進行優化.結果①在誌賀氏菌檢測到IPaH1基因特異性錶達,而大腸埃希氏菌、齣血性大腸埃希氏菌(O157:H7)、腸炎沙門氏菌、阪崎腸桿菌、普通變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌、糞腸毬菌、金黃色葡萄毬菌、單增生李斯特菌、副溶血性弧菌、產氣莢膜梭菌未見錶達;②PCR 法擴增誌賀氏菌IPaH1基因時,第一對引物IPaH11的最適退火溫度為55.0℃-59.0℃,第二對引物IPaH12為51.0℃-55.0℃;兩對引物理想終濃度均為0.1μM.結論 IPaH1基因特異錶達于誌賀氏菌;應用設計的引物通過 PCR 法擴增誌賀氏菌IPaH1基因的最適退火溫度分彆為55.0℃-59.0℃、51.0℃-55.0℃,最適引物終濃度均為0.1μM.
목적검측IPaH1기인재지하씨균특이성표체수평병대 PCR 조건진행우화.방법응용설계적침대IPaH1기인적특이성인물,통과 PCR 법검측IPaH1기인재포씨지하씨균、야생지하씨균、대장애희씨균、출혈성대장애희씨균(O157:H7)、장염사문씨균、판기장간균、보통변형간균、사양아포간균、분장구균、금황색포도구균、단증생리사특균、부용혈성호균、산기협막사균적표체수평,병대 PCR 반응중퇴화온도、최가인물농도등진행우화.결과①재지하씨균검측도IPaH1기인특이성표체,이대장애희씨균、출혈성대장애희씨균(O157:H7)、장염사문씨균、판기장간균、보통변형간균、사양아포간균、분장구균、금황색포도구균、단증생리사특균、부용혈성호균、산기협막사균미견표체;②PCR 법확증지하씨균IPaH1기인시,제일대인물IPaH11적최괄퇴화온도위55.0℃-59.0℃,제이대인물IPaH12위51.0℃-55.0℃;량대인물이상종농도균위0.1μM.결론 IPaH1기인특이표체우지하씨균;응용설계적인물통과 PCR 법확증지하씨균IPaH1기인적최괄퇴화온도분별위55.0℃-59.0℃、51.0℃-55.0℃,최괄인물종농도균위0.1μM.
