中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2012年
10期
1790-1793
,共4页
赵燕颖%李亚刚%杨泽成%张舵舵%赵春燕
趙燕穎%李亞剛%楊澤成%張舵舵%趙春燕
조연영%리아강%양택성%장타타%조춘연
肝细胞癌%MDM2%siRNA%凋亡
肝細胞癌%MDM2%siRNA%凋亡
간세포암%MDM2%siRNA%조망
目的探讨siRNA 对人肝癌 HepG2细胞 MDM2基因表达的抑制作用及对增殖的影响.方法体外合成针对 MDM2基因的siRNA 质粒,转染 HepG2细胞株;应用 RTPCR 和 westernblot方法检测siRNA 对 MDM2和P53基因和蛋白表达的影响,并用 MTT 法检测siRNA 对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期.结果和空白组比转染siMDM21,2的 HepG2细胞的 MDM2基因和蛋白表达减低,而 P53基因和蛋白表达增加.阴性对照质粒组的基因表达未见明显改变.转染siRNA MDM2后细胞生长受到抑制,转染siMDM21,2和阴性对照质粒后的抑制率分别是46.3%、56.1%和3%.和对照组比较,转染siMDM21,2的 hepG2细胞的细胞周期发生明显改变,而转染对照质粒的hepG 细胞周期未发生明显变化.结论 siRNA MDM2可以有效抑制 HepG2细胞株中 MDM2的表达,促进 P53的表达,同时可以使细胞周期发生变化,这可能是其抑制肿瘤细胞增殖的主要机制之一.
目的探討siRNA 對人肝癌 HepG2細胞 MDM2基因錶達的抑製作用及對增殖的影響.方法體外閤成針對 MDM2基因的siRNA 質粒,轉染 HepG2細胞株;應用 RTPCR 和 westernblot方法檢測siRNA 對 MDM2和P53基因和蛋白錶達的影響,併用 MTT 法檢測siRNA 對細胞增殖抑製作用,流式細胞儀檢測細胞週期.結果和空白組比轉染siMDM21,2的 HepG2細胞的 MDM2基因和蛋白錶達減低,而 P53基因和蛋白錶達增加.陰性對照質粒組的基因錶達未見明顯改變.轉染siRNA MDM2後細胞生長受到抑製,轉染siMDM21,2和陰性對照質粒後的抑製率分彆是46.3%、56.1%和3%.和對照組比較,轉染siMDM21,2的 hepG2細胞的細胞週期髮生明顯改變,而轉染對照質粒的hepG 細胞週期未髮生明顯變化.結論 siRNA MDM2可以有效抑製 HepG2細胞株中 MDM2的錶達,促進 P53的錶達,同時可以使細胞週期髮生變化,這可能是其抑製腫瘤細胞增殖的主要機製之一.
목적탐토siRNA 대인간암 HepG2세포 MDM2기인표체적억제작용급대증식적영향.방법체외합성침대 MDM2기인적siRNA 질립,전염 HepG2세포주;응용 RTPCR 화 westernblot방법검측siRNA 대 MDM2화P53기인화단백표체적영향,병용 MTT 법검측siRNA 대세포증식억제작용,류식세포의검측세포주기.결과화공백조비전염siMDM21,2적 HepG2세포적 MDM2기인화단백표체감저,이 P53기인화단백표체증가.음성대조질립조적기인표체미견명현개변.전염siRNA MDM2후세포생장수도억제,전염siMDM21,2화음성대조질립후적억제솔분별시46.3%、56.1%화3%.화대조조비교,전염siMDM21,2적 hepG2세포적세포주기발생명현개변,이전염대조질립적hepG 세포주기미발생명현변화.결론 siRNA MDM2가이유효억제 HepG2세포주중 MDM2적표체,촉진 P53적표체,동시가이사세포주기발생변화,저가능시기억제종류세포증식적주요궤제지일.