中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2012年
5期
340-345
,共6页
张诚%陈家欢%张旭%任芳丽%王银银%韩斌
張誠%陳傢歡%張旭%任芳麗%王銀銀%韓斌
장성%진가환%장욱%임방려%왕은은%한빈
成纤维细胞%细胞培养技术%胶原I型
成纖維細胞%細胞培養技術%膠原I型
성섬유세포%세포배양기술%효원I형
Fibroblasts%Cell culture techniques%Collagen type I
目的以人的皮肤为材料,拟在体外成功分离培养成纤维前体细胞并研究其除皱整形能力.
方法组织块法分离人的皮肤成纤维前体细胞,并通过RT-PCR、流式细胞仪、软琼脂克隆等实验技术对分离的皮肤成纤维前体细胞进行鉴定,同时进行免疫荧光、动物实验检测其在治疗真皮损伤以及除皱整形方面的作用.
结果成功分离并扩增人的皮肤成纤维前体细胞,优化了原代细胞的分离方法,RT-PCR 和流式细胞仪检测结果显示该细胞表达部分干细胞表面标记 HLA-I、HLA-DR、CD90以及 CD105,软琼脂克隆实验表明该细胞不具有致瘤性.免疫荧光结果显示,注射该细胞的裸鼠与对照组相比,真皮层产生更多的 I 型胶原蛋白,皮肤厚度增加.
结论一次取材,体外能够成功持续获得人的原代皮肤成纤维前体细胞,优化了原代细胞分离方法.并且该细胞注射后可以在一定程度上分化为成纤维细胞,产生胶原蛋白,修复受损皮肤.
目的以人的皮膚為材料,擬在體外成功分離培養成纖維前體細胞併研究其除皺整形能力.
方法組織塊法分離人的皮膚成纖維前體細胞,併通過RT-PCR、流式細胞儀、軟瓊脂剋隆等實驗技術對分離的皮膚成纖維前體細胞進行鑒定,同時進行免疫熒光、動物實驗檢測其在治療真皮損傷以及除皺整形方麵的作用.
結果成功分離併擴增人的皮膚成纖維前體細胞,優化瞭原代細胞的分離方法,RT-PCR 和流式細胞儀檢測結果顯示該細胞錶達部分榦細胞錶麵標記 HLA-I、HLA-DR、CD90以及 CD105,軟瓊脂剋隆實驗錶明該細胞不具有緻瘤性.免疫熒光結果顯示,註射該細胞的裸鼠與對照組相比,真皮層產生更多的 I 型膠原蛋白,皮膚厚度增加.
結論一次取材,體外能夠成功持續穫得人的原代皮膚成纖維前體細胞,優化瞭原代細胞分離方法.併且該細胞註射後可以在一定程度上分化為成纖維細胞,產生膠原蛋白,脩複受損皮膚.
목적이인적피부위재료,의재체외성공분리배양성섬유전체세포병연구기제추정형능력.
방법조직괴법분리인적피부성섬유전체세포,병통과RT-PCR、류식세포의、연경지극륭등실험기술대분리적피부성섬유전체세포진행감정,동시진행면역형광、동물실험검측기재치료진피손상이급제추정형방면적작용.
결과성공분리병확증인적피부성섬유전체세포,우화료원대세포적분리방법,RT-PCR 화류식세포의검측결과현시해세포표체부분간세포표면표기 HLA-I、HLA-DR、CD90이급 CD105,연경지극륭실험표명해세포불구유치류성.면역형광결과현시,주사해세포적라서여대조조상비,진피층산생경다적 I 형효원단백,피부후도증가.
결론일차취재,체외능구성공지속획득인적원대피부성섬유전체세포,우화료원대세포분리방법.병차해세포주사후가이재일정정도상분화위성섬유세포,산생효원단백,수복수손피부.
Objective To isolate, culture and identify transit amplifying fibroblasts (TAFs) from human skin in vitro and detect its role in plastic surgery.
@@@@Methods TAFs were isolated and cultured using tissue explants attachment method. The characteristics of TAFs were identified by RT-PCR, flow cytometry and soft agar. The collagen production of TAFs was detected by immunofluorescence in the animals.
@@@@Results TAFs are successfully isolated and amplified. The TAFs express stem cell surface markers HLA-I HLA-DR, CD90 and CD105. The TAFs do not have the tumor formation capacity in the soft agar. Collagen I expression and skin thickness is increased in the nude mice group injected with TAFs as compared with control in the animal.
@@@@Conclusion TAFs can be isolated and cultured in vitro, and can be injected in vivo to differentiate into fibroblasts and produce human collagen to cure the damaged skin.