CAJ | 학술논문

目的探讨NADPH氧化酶在TGF-β1诱导的大鼠腹膜间皮细胞(PMCs)转分化中的作用.方法体外培养SD大鼠原代PMCs,静止24h后,随机分为对照组(A组)、DPI(NADPH氧化酶抑制剂,10μmol/L)组(B组),TGF-β1(10μg/L)组(C组),TGF-β1+DPI(10μmol/L)组(D组,DPI预处理1h).观察NADPH氧化酶亚单位p67phox、活性氧(ROS)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),E-钙粘素(E-cadherin)和Ⅰ型胶原(Col agenⅠ)的表达.用荧光染料(DCF)及激光共聚焦显微镜检测细胞内ROS.分别用RT-PCR方法和Western印迹检测p67phox、E-cadherin、α-SMA和Col agenⅠ mRNA和蛋白的表达情况.结果 TGF-β1显著增加了ROS的产生,刺激24h达到高峰;DPI可抑制TGF-β1诱导的ROS的产生;DPI可抑制TGF-β1诱导的NADPH氧化酶亚单位p67phox mRNA和蛋白的表达上调,与单纯TGF-β1刺激组比较有统计学差异(P<0.05);与此同时DPI可显著抑制TGF-β1诱导的E-cadherin表达下调和α-SMA、Col agenⅠ表达的上调.结论依赖NADPH氧化酶的ROS介导了TGF-β1诱导的大鼠PMCs转分化,NADPH氧化酶可能是腹膜纤维化防治的潜在靶点.
목적탐토NADPH양화매재TGF-β1유도적대서복막간피세포(PMCs)전분화중적작용.방법체외배양SD대서원대PMCs,정지24h후,수궤분위대조조(A조)、DPI(NADPH양화매억제제,10μmol/L)조(B조),TGF-β1(10μg/L)조(C조),TGF-β1+DPI(10μmol/L)조(D조,DPI예처리1h).관찰NADPH양화매아단위p67phox、활성양(ROS)、α-평활기기동단백(α-SMA),E-개점소(E-cadherin)화Ⅰ형효원(Col agenⅠ)적표체.용형광염료(DCF)급격광공취초현미경검측세포내ROS.분별용RT-PCR방법화Western인적검측p67phox、E-cadherin、α-SMA화Col agenⅠ mRNA화단백적표체정황.결과 TGF-β1현저증가료ROS적산생,자격24h체도고봉;DPI가억제TGF-β1유도적ROS적산생;DPI가억제TGF-β1유도적NADPH양화매아단위p67phox mRNA화단백적표체상조,여단순TGF-β1자격조비교유통계학차이(P<0.05);여차동시DPI가현저억제TGF-β1유도적E-cadherin표체하조화α-SMA、Col agenⅠ표체적상조.결론의뢰NADPH양화매적ROS개도료TGF-β1유도적대서PMCs전분화,NADPH양화매가능시복막섬유화방치적잠재파점.