肿瘤药学
腫瘤藥學
종류약학
ANTI-TUMOR PHARMACY
2012年
5期
356-359
,共4页
周文婷%杨岚兰%黄欢%陆勇%张培湘%王杨*
週文婷%楊嵐蘭%黃歡%陸勇%張培湘%王楊*
주문정%양람란%황환%륙용%장배상%왕양*
骨形成蛋白Ⅱ型受体%单克隆抗体%制备%鉴定
骨形成蛋白Ⅱ型受體%單剋隆抗體%製備%鑒定
골형성단백Ⅱ형수체%단극륭항체%제비%감정
目的制备小鼠骨形成蛋白Ⅱ型受体(BMPR-Ⅱ)的单克隆抗体并鉴定其活性.方法以BMPR-Ⅱ为抗原免疫BalB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立稳定分泌抗BMPR-Ⅱ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,克隆化培养后接种于小鼠腹腔制备BMPR-Ⅱ的单克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫组织化学、免疫荧光技术对其进行鉴定.结果获得一株能稳定分泌抗BMPR-Ⅱ单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为3F6,其腹水效价为105,亚类为IgG1;通过免疫印迹、免疫组织化学、免疫荧光证实制备的BMPR-Ⅱ抗体可与组织和细胞中的BMPR-Ⅱ蛋白特异性结合.结论本实验成功制备了可稳定分泌具有生物活性的BMPR-Ⅱ单克隆抗体的杂交瘤细胞及特异性的BMPR-Ⅱ单克隆抗体,可用于BMPR-Ⅱ免疫检测方法的初步应用.
目的製備小鼠骨形成蛋白Ⅱ型受體(BMPR-Ⅱ)的單剋隆抗體併鑒定其活性.方法以BMPR-Ⅱ為抗原免疫BalB/c小鼠,通過雜交瘤技術建立穩定分泌抗BMPR-Ⅱ單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,剋隆化培養後接種于小鼠腹腔製備BMPR-Ⅱ的單剋隆抗體,通過間接酶聯免疫吸附試驗、免疫印跡、免疫組織化學、免疫熒光技術對其進行鑒定.結果穫得一株能穩定分泌抗BMPR-Ⅱ單剋隆抗體的雜交瘤細胞,命名為3F6,其腹水效價為105,亞類為IgG1;通過免疫印跡、免疫組織化學、免疫熒光證實製備的BMPR-Ⅱ抗體可與組織和細胞中的BMPR-Ⅱ蛋白特異性結閤.結論本實驗成功製備瞭可穩定分泌具有生物活性的BMPR-Ⅱ單剋隆抗體的雜交瘤細胞及特異性的BMPR-Ⅱ單剋隆抗體,可用于BMPR-Ⅱ免疫檢測方法的初步應用.
목적제비소서골형성단백Ⅱ형수체(BMPR-Ⅱ)적단극륭항체병감정기활성.방법이BMPR-Ⅱ위항원면역BalB/c소서,통과잡교류기술건립은정분비항BMPR-Ⅱ단극륭항체적잡교류세포주,극륭화배양후접충우소서복강제비BMPR-Ⅱ적단극륭항체,통과간접매련면역흡부시험、면역인적、면역조직화학、면역형광기술대기진행감정.결과획득일주능은정분비항BMPR-Ⅱ단극륭항체적잡교류세포,명명위3F6,기복수효개위105,아류위IgG1;통과면역인적、면역조직화학、면역형광증실제비적BMPR-Ⅱ항체가여조직화세포중적BMPR-Ⅱ단백특이성결합.결론본실험성공제비료가은정분비구유생물활성적BMPR-Ⅱ단극륭항체적잡교류세포급특이성적BMPR-Ⅱ단극륭항체,가용우BMPR-Ⅱ면역검측방법적초보응용.
