安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2014年
12期
1722-1726
,共5页
骨髓间质干细胞%蛋白质组学%成骨分化%质谱鉴定%生物信息学
骨髓間質榦細胞%蛋白質組學%成骨分化%質譜鑒定%生物信息學
골수간질간세포%단백질조학%성골분화%질보감정%생물신식학
hMSCs%osteogenic differentiation%proteomics%mass spectra identification%bioinformatics
目的 比较入骨髓间质干细胞(hMSCs)诱导成骨分化过程中的蛋白质组差异,寻找hMSCs成骨分化相关蛋白质.方法 体外培养hMSCs并诱导成骨分化,收集hMSCs和成骨诱导分化3d的细胞的全蛋白,应用双向凝胶电泳(2-DE)分离和图像分析软件进行蛋白质点的识别和检测,通过比较蛋白质组学技术找出凝胶上差异2.0倍以上的蛋白质点,应用基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和生物信息学方法对差异蛋白点进行蛋白质的鉴定和分析.结果 hMSCs在体外成功诱导成骨分化,通过2-DE分离、MALDI-TOF-MS分析和生物信息学方法鉴定出了38种差异蛋白,其中22种蛋白质在成骨诱导3d后表达明显上调,16种蛋白质在成骨诱导3d后表达明显下调.利用Gene Ontology对所鉴定的蛋白质按分子功能和生物学途径进行分析显示,参与体内代谢、发育过程、催化反应和酶调节活性的蛋白质分别占29%、32%、44%、16%.结论 蛋白质组学较好地显示了hMSCs诱导成骨分化过程中的蛋白质表达差异,这为进一步阐明hMSCs成骨分化的分子机制提供了新的思路.
目的 比較入骨髓間質榦細胞(hMSCs)誘導成骨分化過程中的蛋白質組差異,尋找hMSCs成骨分化相關蛋白質.方法 體外培養hMSCs併誘導成骨分化,收集hMSCs和成骨誘導分化3d的細胞的全蛋白,應用雙嚮凝膠電泳(2-DE)分離和圖像分析軟件進行蛋白質點的識彆和檢測,通過比較蛋白質組學技術找齣凝膠上差異2.0倍以上的蛋白質點,應用基質輔助激光解析離子化飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)和生物信息學方法對差異蛋白點進行蛋白質的鑒定和分析.結果 hMSCs在體外成功誘導成骨分化,通過2-DE分離、MALDI-TOF-MS分析和生物信息學方法鑒定齣瞭38種差異蛋白,其中22種蛋白質在成骨誘導3d後錶達明顯上調,16種蛋白質在成骨誘導3d後錶達明顯下調.利用Gene Ontology對所鑒定的蛋白質按分子功能和生物學途徑進行分析顯示,參與體內代謝、髮育過程、催化反應和酶調節活性的蛋白質分彆佔29%、32%、44%、16%.結論 蛋白質組學較好地顯示瞭hMSCs誘導成骨分化過程中的蛋白質錶達差異,這為進一步闡明hMSCs成骨分化的分子機製提供瞭新的思路.
목적 비교입골수간질간세포(hMSCs)유도성골분화과정중적단백질조차이,심조hMSCs성골분화상관단백질.방법 체외배양hMSCs병유도성골분화,수집hMSCs화성골유도분화3d적세포적전단백,응용쌍향응효전영(2-DE)분리화도상분석연건진행단백질점적식별화검측,통과비교단백질조학기술조출응효상차이2.0배이상적단백질점,응용기질보조격광해석리자화비행시간질보(MALDI-TOF-MS)화생물신식학방법대차이단백점진행단백질적감정화분석.결과 hMSCs재체외성공유도성골분화,통과2-DE분리、MALDI-TOF-MS분석화생물신식학방법감정출료38충차이단백,기중22충단백질재성골유도3d후표체명현상조,16충단백질재성골유도3d후표체명현하조.이용Gene Ontology대소감정적단백질안분자공능화생물학도경진행분석현시,삼여체내대사、발육과정、최화반응화매조절활성적단백질분별점29%、32%、44%、16%.결론 단백질조학교호지현시료hMSCs유도성골분화과정중적단백질표체차이,저위진일보천명hMSCs성골분화적분자궤제제공료신적사로.