安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2014年
12期
1701-1705
,共5页
吴乐乐%俞广进%陈双升%熊奇如
吳樂樂%俞廣進%陳雙升%熊奇如
오악악%유엄진%진쌍승%웅기여
CD133+%Notch 1信号通路%肝癌
CD133+%Notch 1信號通路%肝癌
CD133+%Notch 1신호통로%간암
CD133+%Notch 1 signaling%liver cancer
目的 研究人肝癌SMMC 7721细胞中CD133+细胞的干细胞特性,初步探讨调控Notch 1信号通路对CD133+细胞亚群增殖和凋亡的影响.方法 流式分选和检测SMMC 7721细胞中的CD133+细胞.利用软琼脂集落实验及裸鼠成瘤实验验证CD133+细胞的干细胞特性.RT-PCR法检测CD133+细胞中Notch信号系统的表达;将分选出来的CD133+细胞分为激活组(加入Notch 1激活剂Jagged 1)、抑制组(加入Notch 1抑制剂DAPT)和空白对照组(加入PBS缓冲液),RT-PCR法检测3组细胞Hes-1基因的表达,MTT法和流式细胞仪检测各组细胞增殖能力和凋亡能力.结果 成功分选出CD133+亚群细胞;软琼脂集落实验和裸鼠成瘤实验表明CD133+细胞较CD133-细胞具有较强集落形成能力和体内成瘤能力;RT-PCR检测CD133+细胞中仅表达Notch 1/Jagged 1信号通路;激活组Hes-1表达强度增强,抑制组表达强度减弱,差异有统计学意义(P＜0.05).MTT检测激活组、抑制组和空白对照组吸光度值差异均有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测激活组总凋亡率大于空白对照组,反之,抑制组总凋亡率小于空白对照组,各组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD133+细胞是人肝癌SMMC 7721细胞中干细胞标志物之一,Notch 1信号通路对CD133+细胞的增殖和凋亡发挥着重要作用.
目的 研究人肝癌SMMC 7721細胞中CD133+細胞的榦細胞特性,初步探討調控Notch 1信號通路對CD133+細胞亞群增殖和凋亡的影響.方法 流式分選和檢測SMMC 7721細胞中的CD133+細胞.利用軟瓊脂集落實驗及裸鼠成瘤實驗驗證CD133+細胞的榦細胞特性.RT-PCR法檢測CD133+細胞中Notch信號繫統的錶達;將分選齣來的CD133+細胞分為激活組(加入Notch 1激活劑Jagged 1)、抑製組(加入Notch 1抑製劑DAPT)和空白對照組(加入PBS緩遲液),RT-PCR法檢測3組細胞Hes-1基因的錶達,MTT法和流式細胞儀檢測各組細胞增殖能力和凋亡能力.結果 成功分選齣CD133+亞群細胞;軟瓊脂集落實驗和裸鼠成瘤實驗錶明CD133+細胞較CD133-細胞具有較彊集落形成能力和體內成瘤能力;RT-PCR檢測CD133+細胞中僅錶達Notch 1/Jagged 1信號通路;激活組Hes-1錶達彊度增彊,抑製組錶達彊度減弱,差異有統計學意義(P＜0.05).MTT檢測激活組、抑製組和空白對照組吸光度值差異均有統計學意義(P＜0.05).流式細胞儀檢測激活組總凋亡率大于空白對照組,反之,抑製組總凋亡率小于空白對照組,各組差異有統計學意義(P＜0.05).結論 CD133+細胞是人肝癌SMMC 7721細胞中榦細胞標誌物之一,Notch 1信號通路對CD133+細胞的增殖和凋亡髮揮著重要作用.
목적 연구인간암SMMC 7721세포중CD133+세포적간세포특성,초보탐토조공Notch 1신호통로대CD133+세포아군증식화조망적영향.방법 류식분선화검측SMMC 7721세포중적CD133+세포.이용연경지집락실험급라서성류실험험증CD133+세포적간세포특성.RT-PCR법검측CD133+세포중Notch신호계통적표체;장분선출래적CD133+세포분위격활조(가입Notch 1격활제Jagged 1)、억제조(가입Notch 1억제제DAPT)화공백대조조(가입PBS완충액),RT-PCR법검측3조세포Hes-1기인적표체,MTT법화류식세포의검측각조세포증식능력화조망능력.결과 성공분선출CD133+아군세포;연경지집락실험화라서성류실험표명CD133+세포교CD133-세포구유교강집락형성능력화체내성류능력;RT-PCR검측CD133+세포중부표체Notch 1/Jagged 1신호통로;격활조Hes-1표체강도증강,억제조표체강도감약,차이유통계학의의(P＜0.05).MTT검측격활조、억제조화공백대조조흡광도치차이균유통계학의의(P＜0.05).류식세포의검측격활조총조망솔대우공백대조조,반지,억제조총조망솔소우공백대조조,각조차이유통계학의의(P＜0.05).결론 CD133+세포시인간암SMMC 7721세포중간세포표지물지일,Notch 1신호통로대CD133+세포적증식화조망발휘착중요작용.
