热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
11期
2230-2235
,共6页
李本金%谢世勇%刘裴清%谢廷鑫%陈庆河%翁启勇
李本金%謝世勇%劉裴清%謝廷鑫%陳慶河%翁啟勇
리본금%사세용%류배청%사정흠%진경하%옹계용
烟草%青枯病菌%巢式PCR%分子检测
煙草%青枯病菌%巢式PCR%分子檢測
연초%청고병균%소식PCR%분자검측
Tobacco%Ralstonia solanacearum%Nested-PCR%Molecular detection
利用细菌16S-23S rDNA内源转录间隔区通用引物L1/L2扩增烟草青枯病菌基因组DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,经与近缘种序列多重比对分析后,设计1对特异性引物RsF/RsR,用于包括烟草青枯病菌在内的15种不同细菌、5种真菌、3种卵菌基因组DNA的PCR扩增.结果表明:在优化的反应体系与程序条件下,该对引物只能从烟草青枯病菌中扩增出241 bp的特异片段,并通过序列测定验证了其准确性;将引物RsF/RsR与细菌通用引物L1/L2进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达0.4 fg/μL,较常规PCR提高1 000倍,表明该对引物能有效地用于烟草组织及土壤中青枯病菌的检测.此结果对烟草青枯病的早期诊断、快速检测及病害流行学研究具有重要意义.
利用細菌16S-23S rDNA內源轉錄間隔區通用引物L1/L2擴增煙草青枯病菌基因組DNA,併對其擴增產物進行剋隆測序,經與近緣種序列多重比對分析後,設計1對特異性引物RsF/RsR,用于包括煙草青枯病菌在內的15種不同細菌、5種真菌、3種卵菌基因組DNA的PCR擴增.結果錶明:在優化的反應體繫與程序條件下,該對引物隻能從煙草青枯病菌中擴增齣241 bp的特異片段,併通過序列測定驗證瞭其準確性;將引物RsF/RsR與細菌通用引物L1/L2進行巢式PCR擴增後,其檢測靈敏度在DNA水平上可達0.4 fg/μL,較常規PCR提高1 000倍,錶明該對引物能有效地用于煙草組織及土壤中青枯病菌的檢測.此結果對煙草青枯病的早期診斷、快速檢測及病害流行學研究具有重要意義.
이용세균16S-23S rDNA내원전록간격구통용인물L1/L2확증연초청고병균기인조DNA,병대기확증산물진행극륭측서,경여근연충서렬다중비대분석후,설계1대특이성인물RsF/RsR,용우포괄연초청고병균재내적15충불동세균、5충진균、3충란균기인조DNA적PCR확증.결과표명:재우화적반응체계여정서조건하,해대인물지능종연초청고병균중확증출241 bp적특이편단,병통과서렬측정험증료기준학성;장인물RsF/RsR여세균통용인물L1/L2진행소식PCR확증후,기검측령민도재DNA수평상가체0.4 fg/μL,교상규PCR제고1 000배,표명해대인물능유효지용우연초조직급토양중청고병균적검측.차결과대연초청고병적조기진단、쾌속검측급병해류행학연구구유중요의의.
