热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
11期
2223-2229
,共7页
桑庆亮%赖钟雄%林玉玲%陈裕坤
桑慶亮%賴鐘雄%林玉玲%陳裕坤
상경량%뢰종웅%림옥령%진유곤
荔枝%胚性愈伤组织%基因枪%遗传转化%瞬时表达
荔枝%胚性愈傷組織%基因鎗%遺傳轉化%瞬時錶達
려지%배성유상조직%기인창%유전전화%순시표체
Litchi chinensis Sonn.%Embryonic calli%Particle bombardment%Genetic transformation%Transient expression
以幼胚来源的荔枝EC作为受体材料,采用基因枪轰击的方法将外源gus基因转入荔枝,并对不同条件下的GUS瞬时表达进行了详细研究.结果表明:在其它参数不变的条件下,轰击距离、真空度、可裂膜片压力、金粉用量、质粒DNA用量等理化参数显著影响GUS瞬时表达;渗透处理可显著促进GUS瞬时表达.因此,荔枝EC基因枪转化的适宜条件为在轰击距离6 cm、真空度84.66 kPa、可裂膜片压力7 584.23 kPa、轰击1次的情况下,每次轰击用1 μg质粒DNA包裹600 μg金粉对事先用0.25 mol/L前处理4h的荔枝EC轰击,并在轰击后渗透处理20 h.另外,经50 mg/L潮霉素筛选得到荔枝抗性愈伤组织,并通过体胚发生途径获再生植株,且GUS染色显示获得了稳定表达GUS蛋白的细胞系和植株.
以幼胚來源的荔枝EC作為受體材料,採用基因鎗轟擊的方法將外源gus基因轉入荔枝,併對不同條件下的GUS瞬時錶達進行瞭詳細研究.結果錶明:在其它參數不變的條件下,轟擊距離、真空度、可裂膜片壓力、金粉用量、質粒DNA用量等理化參數顯著影響GUS瞬時錶達;滲透處理可顯著促進GUS瞬時錶達.因此,荔枝EC基因鎗轉化的適宜條件為在轟擊距離6 cm、真空度84.66 kPa、可裂膜片壓力7 584.23 kPa、轟擊1次的情況下,每次轟擊用1 μg質粒DNA包裹600 μg金粉對事先用0.25 mol/L前處理4h的荔枝EC轟擊,併在轟擊後滲透處理20 h.另外,經50 mg/L潮黴素篩選得到荔枝抗性愈傷組織,併通過體胚髮生途徑穫再生植株,且GUS染色顯示穫得瞭穩定錶達GUS蛋白的細胞繫和植株.
이유배래원적려지EC작위수체재료,채용기인창굉격적방법장외원gus기인전입려지,병대불동조건하적GUS순시표체진행료상세연구.결과표명:재기타삼수불변적조건하,굉격거리、진공도、가렬막편압력、금분용량、질립DNA용량등이화삼수현저영향GUS순시표체;삼투처리가현저촉진GUS순시표체.인차,려지EC기인창전화적괄의조건위재굉격거리6 cm、진공도84.66 kPa、가렬막편압력7 584.23 kPa、굉격1차적정황하,매차굉격용1 μg질립DNA포과600 μg금분대사선용0.25 mol/L전처리4h적려지EC굉격,병재굉격후삼투처리20 h.령외,경50 mg/L조매소사선득도려지항성유상조직,병통과체배발생도경획재생식주,차GUS염색현시획득료은정표체GUS단백적세포계화식주.
