CAJ | 학술논문

为快速了解鲫源嗜水气单胞菌株毒力基因携带情况及与菌株基因型的相关性,建立多重PCR法和ERIC-PCR分子分型,为临床快速检测、菌株分型和菌株致病性分析提供依据.通过单重PCR法检测出标准菌株ATCC7966内5个毒力基因气溶素(aerolysin,aer)、溶血素(hemolysin,hly)、细胞毒性肠毒素(cytotoxic enterotoxin,alt)、胞外蛋白酶(extracellular protease,ahp)和细胞肠兴奋性肠毒素(intestinal cells of excitatory enterotoxin,act),其扩增产物长度依次为300 bp、592 bp、442 bp、856 bp和500 bp.在此基础上,优化并建立特异性高,敏感度达7.2×102cfu· mL-1多重PCR法,用于检测从江苏射阳地区患病水产动物体内分离的17株嗜水气单胞菌5个毒力基因携带率.结果显示,毒力基因act的携带率为100％,而80％的菌株5个毒力基因均有检出.采用ERlC-PCR分子分型技术,以标准菌株ATCC7966为对照,对17株鲫源致病性嗜水气单胞菌进行基因分型,获得两种基因型,分别描述为A型和B型,其中B型菌株14株,带型与ATCC7966一致,认为是当地的主要流行株.探究菌株基因型与毒力基因分布相关性,携带5个毒力基因的均为B型菌株,而所有A型菌株存在一或多个毒力基因缺失,有可能是此类菌株更易发生毒力基因漂变,但还需进一步研究.
위쾌속료해즉원기수기단포균주독력기인휴대정황급여균주기인형적상관성,건립다중PCR법화ERIC-PCR분자분형,위림상쾌속검측、균주분형화균주치병성분석제공의거.통과단중PCR법검측출표준균주ATCC7966내5개독력기인기용소(aerolysin,aer)、용혈소(hemolysin,hly)、세포독성장독소(cytotoxic enterotoxin,alt)、포외단백매(extracellular protease,ahp)화세포장흥강성장독소(intestinal cells of excitatory enterotoxin,act),기확증산물장도의차위300 bp、592 bp、442 bp、856 bp화500 bp.재차기출상,우화병건립특이성고,민감도체7.2×102cfu· mL-1다중PCR법,용우검측종강소사양지구환병수산동물체내분리적17주기수기단포균5개독력기인휴대솔.결과현시,독력기인act적휴대솔위100％,이80％적균주5개독력기인균유검출.채용ERlC-PCR분자분형기술,이표준균주ATCC7966위대조,대17주즉원치병성기수기단포균진행기인분형,획득량충기인형,분별묘술위A형화B형,기중B형균주14주,대형여ATCC7966일치,인위시당지적주요류행주.탐구균주기인형여독력기인분포상관성,휴대5개독력기인적균위B형균주,이소유A형균주존재일혹다개독력기인결실,유가능시차류균주경역발생독력기인표변,단환수진일보연구.