温州医科大学学报
溫州醫科大學學報
온주의과대학학보
Journal of Wenzhou Medical University
2014年
11期
792-796
,共5页
夏立广%李仲荣%刘森清%王永飚%朱利斌%赵一鸣
夏立廣%李仲榮%劉森清%王永飚%硃利斌%趙一鳴
하립엄%리중영%류삼청%왕영표%주리빈%조일명
神经干细胞%神经递质%表达%胎鼠
神經榦細胞%神經遞質%錶達%胎鼠
신경간세포%신경체질%표체%태서
NSCs%neurotransmitter%expression%fetal rats
目的:观察同一胎鼠肠神经干细胞和脑神经干细胞的神经递质表达情况,探索神经干细胞移植治疗相关疾病的合适干细胞源。方法:从孕20d的同一SD胚鼠中分别提取肠神经干细胞和脑神经干细胞,采用改良的神经干细胞培养液反复传代,取传代培养6~10d后得到的2种不同来源的神经细胞球,通过琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测法及流式细胞仪检测法测定神经干细胞4种神经递质的表达。结果:2种不同来源的神经干细胞的琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测显示:肠神经干细胞神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)与相应的对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);脑神经干细胞nNOS、ChAT、多巴胺β羟化酶(DβH)与相应的对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);2种不同来源神经干细胞间nNOS、ChAT比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测提示:肠神经干细胞γ-氨基丁酸(GABA)、nNOS、ChAT、DβH阳性细胞合计率分别为1.59%、14.97%、5.43%、1.36%,其中nNOS、ChAT与相应的同型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);而脑神经干细胞GABA、nNOS、ChAT、DβH阳性细胞合计率分别为1.68%、6.14%、25.42%、9.30%,其中nNOS、ChAT、DβH与相应的同型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肠神经干细胞表达的神经递质主要为一氧化氮(NO)和乙酰胆碱(Ach),以NO为主;脑神经干细胞表达的神经递质为NO、Ach和去甲肾上腺素(NA),以Ach为主;2种神经干细胞均无明显表达GABA。
目的:觀察同一胎鼠腸神經榦細胞和腦神經榦細胞的神經遞質錶達情況,探索神經榦細胞移植治療相關疾病的閤適榦細胞源。方法:從孕20d的同一SD胚鼠中分彆提取腸神經榦細胞和腦神經榦細胞,採用改良的神經榦細胞培養液反複傳代,取傳代培養6~10d後得到的2種不同來源的神經細胞毬,通過瓊脂糖預包埋免疫細胞化學檢測法及流式細胞儀檢測法測定神經榦細胞4種神經遞質的錶達。結果:2種不同來源的神經榦細胞的瓊脂糖預包埋免疫細胞化學檢測顯示:腸神經榦細胞神經元型一氧化氮閤酶(nNOS)、膽堿乙酰轉移酶(ChAT)與相應的對照組比較差異有統計學意義(P<0.05);腦神經榦細胞nNOS、ChAT、多巴胺β羥化酶(DβH)與相應的對照組比較差異有統計學意義(P<0.05);2種不同來源神經榦細胞間nNOS、ChAT比較差異有統計學意義(P<0.05)。流式細胞儀檢測提示:腸神經榦細胞γ-氨基丁痠(GABA)、nNOS、ChAT、DβH暘性細胞閤計率分彆為1.59%、14.97%、5.43%、1.36%,其中nNOS、ChAT與相應的同型對照組比較差異有統計學意義(P<0.05);而腦神經榦細胞GABA、nNOS、ChAT、DβH暘性細胞閤計率分彆為1.68%、6.14%、25.42%、9.30%,其中nNOS、ChAT、DβH與相應的同型對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論:腸神經榦細胞錶達的神經遞質主要為一氧化氮(NO)和乙酰膽堿(Ach),以NO為主;腦神經榦細胞錶達的神經遞質為NO、Ach和去甲腎上腺素(NA),以Ach為主;2種神經榦細胞均無明顯錶達GABA。
목적:관찰동일태서장신경간세포화뇌신경간세포적신경체질표체정황,탐색신경간세포이식치료상관질병적합괄간세포원。방법:종잉20d적동일SD배서중분별제취장신경간세포화뇌신경간세포,채용개량적신경간세포배양액반복전대,취전대배양6~10d후득도적2충불동래원적신경세포구,통과경지당예포매면역세포화학검측법급류식세포의검측법측정신경간세포4충신경체질적표체。결과:2충불동래원적신경간세포적경지당예포매면역세포화학검측현시:장신경간세포신경원형일양화담합매(nNOS)、담감을선전이매(ChAT)여상응적대조조비교차이유통계학의의(P<0.05);뇌신경간세포nNOS、ChAT、다파알β간화매(DβH)여상응적대조조비교차이유통계학의의(P<0.05);2충불동래원신경간세포간nNOS、ChAT비교차이유통계학의의(P<0.05)。류식세포의검측제시:장신경간세포γ-안기정산(GABA)、nNOS、ChAT、DβH양성세포합계솔분별위1.59%、14.97%、5.43%、1.36%,기중nNOS、ChAT여상응적동형대조조비교차이유통계학의의(P<0.05);이뇌신경간세포GABA、nNOS、ChAT、DβH양성세포합계솔분별위1.68%、6.14%、25.42%、9.30%,기중nNOS、ChAT、DβH여상응적동형대조조비교차이유통계학의의(P<0.05)。결론:장신경간세포표체적신경체질주요위일양화담(NO)화을선담감(Ach),이NO위주;뇌신경간세포표체적신경체질위NO、Ach화거갑신상선소(NA),이Ach위주;2충신경간세포균무명현표체GABA。
Objective: To observe the expression of neurotransmitters in enterogenous neural stem cells (ENSCs) and central nervous system neural stem cells (CNS-NSCs) from the same fetal rats, and to explore a suitable stem cell source for neural stem cells transplantation.Methods: Rat ENSCs and CNS-NSCs were ex-tracted from the same 20-day SD rat embryos followed by repeated subculture using improved neural stem cell medium. Two different kinds of nerve bulbs originated from 6-10 days culturing were chosen. The expressions of four transmitters on ENSCs and CNS-NSCs were analyzed by agarose pre-embedded immunocytochemistry as-say and lfow cytometry.Results: After analyzing data of imunocytochemistry assay, we found the expression of nNOS and ChAT on ENSCs; nNOS, ChAT and DβH on CNS-NSCs. Signiifcant differences of nNOS and ChAT expression were observed between ENSCs and CNS-NSCs respectively (P<0.05). Flow cytometry analysis in-dicated GABA(+), nNOS(+), ChAT(+), DβH(+) cells averagely accounted for 1.59%, 14.97%, 5.43%, 1.36% in ENSCs respectively,within which nNOS and ChAT expression were signiifcantly different from isotype groups (P<0.05). In CNS-NSCs, the pecentages were 1.68%, 6.14%, 25.42%, 9.30% on average, comparing with isotype groups, the differences of nNOS, ChAT, and DβH expression were all signiifcant (P<0.05).Conclusion: ENSCs express neurotransmitters including NO and Ache, with NO of dominance. While CNS-NSCs express neurotrans-mitters such as NO, Ache and NE, especially Ache. There is almost no GABA expression in either ENSCs or CNS-NSCs.