中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2014年
6期
433-437
,共5页
万晓珊%刘彦隆%张翼%肖业臣%张海淼%许竹梅%肖健
萬曉珊%劉彥隆%張翼%肖業臣%張海淼%許竹梅%肖健
만효산%류언륭%장익%초업신%장해묘%허죽매%초건
内质网应激%3T3-L1 细胞%成纤维细胞生长因子 21
內質網應激%3T3-L1 細胞%成纖維細胞生長因子 21
내질망응격%3T3-L1 세포%성섬유세포생장인자 21
Endoplasmic reticulum stress%3T3-L1 cells%Fibroblast growth factor 21
目的在 mRNA 水平探讨内质网应激对3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子21表达的影响。<br> 方法利用经典鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,再用毒胡萝卜内酯分别按照剂量梯度(0、6.25、12.5、25、50和100 nmol/L)和时间梯度(0、1、3、6和12 h)进行处理,实时 PCR 检测内质网应激相关蛋白 C/EBP 同源蛋白和葡萄糖调节蛋白78以及成纤维细胞生长因子21 mRNA的表达水平。<br> 结果毒胡萝卜内酯能诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞发生内质网应激,促进 C/EBP 同源蛋白、葡萄糖调节蛋白78和成纤维细胞生长因子21 mRNA 水平显著升高,且与毒胡萝卜内酯的剂量和处理时间呈正相关。当用100 nmol/L毒胡萝卜内酯处理6 h 后,成纤维细胞生长因子21 mRNA水平显著增高,为对照组的114.55倍(P<0.05)。蛋白激酶 C 抑制剂钙磷酸蛋白 C 能阻断由毒胡萝卜内酯诱导的内质网应激,并伴随成纤维细胞生长因子21 mRNA 水平的下降。<br> 结论内质网应激能上调3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子21 mRNA 表达,且可被蛋白激酶 C 抑制剂钙磷酸蛋白 C 阻断。
目的在 mRNA 水平探討內質網應激對3T3-L1脂肪細胞成纖維細胞生長因子21錶達的影響。<br> 方法利用經典鷄尾酒法誘導3T3-L1前脂肪細胞分化,再用毒鬍蘿蔔內酯分彆按照劑量梯度(0、6.25、12.5、25、50和100 nmol/L)和時間梯度(0、1、3、6和12 h)進行處理,實時 PCR 檢測內質網應激相關蛋白 C/EBP 同源蛋白和葡萄糖調節蛋白78以及成纖維細胞生長因子21 mRNA的錶達水平。<br> 結果毒鬍蘿蔔內酯能誘導分化成熟的3T3-L1脂肪細胞髮生內質網應激,促進 C/EBP 同源蛋白、葡萄糖調節蛋白78和成纖維細胞生長因子21 mRNA 水平顯著升高,且與毒鬍蘿蔔內酯的劑量和處理時間呈正相關。噹用100 nmol/L毒鬍蘿蔔內酯處理6 h 後,成纖維細胞生長因子21 mRNA水平顯著增高,為對照組的114.55倍(P<0.05)。蛋白激酶 C 抑製劑鈣燐痠蛋白 C 能阻斷由毒鬍蘿蔔內酯誘導的內質網應激,併伴隨成纖維細胞生長因子21 mRNA 水平的下降。<br> 結論內質網應激能上調3T3-L1脂肪細胞成纖維細胞生長因子21 mRNA 錶達,且可被蛋白激酶 C 抑製劑鈣燐痠蛋白 C 阻斷。
목적재 mRNA 수평탐토내질망응격대3T3-L1지방세포성섬유세포생장인자21표체적영향。<br> 방법이용경전계미주법유도3T3-L1전지방세포분화,재용독호라복내지분별안조제량제도(0、6.25、12.5、25、50화100 nmol/L)화시간제도(0、1、3、6화12 h)진행처리,실시 PCR 검측내질망응격상관단백 C/EBP 동원단백화포도당조절단백78이급성섬유세포생장인자21 mRNA적표체수평。<br> 결과독호라복내지능유도분화성숙적3T3-L1지방세포발생내질망응격,촉진 C/EBP 동원단백、포도당조절단백78화성섬유세포생장인자21 mRNA 수평현저승고,차여독호라복내지적제량화처리시간정정상관。당용100 nmol/L독호라복내지처리6 h 후,성섬유세포생장인자21 mRNA수평현저증고,위대조조적114.55배(P<0.05)。단백격매 C 억제제개린산단백 C 능조단유독호라복내지유도적내질망응격,병반수성섬유세포생장인자21 mRNA 수평적하강。<br> 결론내질망응격능상조3T3-L1지방세포성섬유세포생장인자21 mRNA 표체,차가피단백격매 C 억제제개린산단백 C 조단。
Objective To study the effect of endoplasmic reticulum stress on FGF21 expression in the differentiated 3T3-L1 cells. <br> Methods 3T3-L1 pre-adipocytes were cultured in vitro and differentiated into adipocytes, and then treated with different concentrations of thapsigargin (TG) (0, 6.25, 12.5, 25, 50 and 100 nmol/L) for 6 h or 100 nmol/L TG for different time (0, 1, 3, 6 and 12 h). The mRNA levels of CHOP, GRP78 and FGF21 were detected using real time PCR. <br> Results TG-induced endoplasmic reticulum stress increased mRNA expression of CHOP, GRP78 and FGF21 in a dose-and time-dependent manner. FGF21 mRNA expression in 3T3-L1 adipocytes treated by 100 nmol/L TG for 6 h was significantly higher than that of control group (P < 0.05). PKC inhibitor calphostin C markedly inhibited TG-induceed endoplasmic reticulum stress, and reduced FGF21 mRNA expression. <br> Conclusion FGF21 mRNA expression can be up-regulated by endoplasmic reticulum stress, which can be inhibited by PKC inhibitor calphostin C.