江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
11期
40-44
,共5页
张颖%李冰%朱健%蒋高中
張穎%李冰%硃健%蔣高中
장영%리빙%주건%장고중
异育银鲫%肌肉生长抑制素%同源法克隆%末端快速扩增法%序列分析%组织表达分析
異育銀鯽%肌肉生長抑製素%同源法剋隆%末耑快速擴增法%序列分析%組織錶達分析
이육은즉%기육생장억제소%동원법극륭%말단쾌속확증법%서렬분석%조직표체분석
采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)方法分离克隆了异育银鲫(Allogyoge-netics crucian carp)中科3号肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因全长DNA,得到3394 bp全长的DNA,包含3段外显子和2段内含子,其中2098 bp的全长cDNA在NCBI数据库中进行序列比对后,确定为异育银鲫中科3号MSTN基因。对推测的MSTN基因氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:MSTN基因在异育银鲫与斑马鱼及其他鱼类间的氨基酸序列相似度为73.5%~98.0%,与鲤鱼MSTN基因相似度最高(98.0%),不同物种间MSTN的氨基酸序列较为保守。用半定量RT-PCR检测MSTN基因在异育银鲫心、肠、肌、脑、鳃和肝的相对表达量结果表明,MSTN基因在脑中含量最高,其次是肌、鳃、心、肠,在肝脏中含量最低。
採用同源剋隆和末耑快速擴增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)方法分離剋隆瞭異育銀鯽(Allogyoge-netics crucian carp)中科3號肌肉生長抑製素(myostatin,MSTN)基因全長DNA,得到3394 bp全長的DNA,包含3段外顯子和2段內含子,其中2098 bp的全長cDNA在NCBI數據庫中進行序列比對後,確定為異育銀鯽中科3號MSTN基因。對推測的MSTN基因氨基痠序列進行同源性比對和繫統分析顯示:MSTN基因在異育銀鯽與斑馬魚及其他魚類間的氨基痠序列相似度為73.5%~98.0%,與鯉魚MSTN基因相似度最高(98.0%),不同物種間MSTN的氨基痠序列較為保守。用半定量RT-PCR檢測MSTN基因在異育銀鯽心、腸、肌、腦、鰓和肝的相對錶達量結果錶明,MSTN基因在腦中含量最高,其次是肌、鰓、心、腸,在肝髒中含量最低。
채용동원극륭화말단쾌속확증(rapid amplication of cDNA ends,RACE)방법분리극륭료이육은즉(Allogyoge-netics crucian carp)중과3호기육생장억제소(myostatin,MSTN)기인전장DNA,득도3394 bp전장적DNA,포함3단외현자화2단내함자,기중2098 bp적전장cDNA재NCBI수거고중진행서렬비대후,학정위이육은즉중과3호MSTN기인。대추측적MSTN기인안기산서렬진행동원성비대화계통분석현시:MSTN기인재이육은즉여반마어급기타어류간적안기산서렬상사도위73.5%~98.0%,여리어MSTN기인상사도최고(98.0%),불동물충간MSTN적안기산서렬교위보수。용반정량RT-PCR검측MSTN기인재이육은즉심、장、기、뇌、새화간적상대표체량결과표명,MSTN기인재뇌중함량최고,기차시기、새、심、장,재간장중함량최저。