江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
11期
37-39,40
,共4页
韩光杰%孙俊%李传明%刘琴%徐健
韓光傑%孫俊%李傳明%劉琴%徐健
한광걸%손준%리전명%류금%서건
苏云金芽孢杆菌%原生质体%制备%转化
囌雲金芽孢桿菌%原生質體%製備%轉化
소운금아포간균%원생질체%제비%전화
研究苏云金芽孢杆菌原生质体制备与再生的最佳条件,为进一步提高原生质体转化率打下基础。通过酶解法对苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种工业生产菌株(Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki)2671原生质体的制备及再生条件进行了研究,考察了菌体生长状态、溶菌酶浓度、处理时间等影响因素,采用PEG法对大质粒进行原生质转化。结果表明,对数生长前期的菌体(培养3 h),以SMML作渗透压稳定剂,溶菌酶浓度7 mg/mL,40℃下酶解40 min,原生质体生成量可达5.7×107个/mL,再生率可达14.1%。在此条件下,采用PEG法可将大质粒pLTV1-ep成功转化宿主菌,转化率为0.3 CFU/μg。
研究囌雲金芽孢桿菌原生質體製備與再生的最佳條件,為進一步提高原生質體轉化率打下基礎。通過酶解法對囌雲金芽孢桿菌庫斯塔剋亞種工業生產菌株(Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki)2671原生質體的製備及再生條件進行瞭研究,攷察瞭菌體生長狀態、溶菌酶濃度、處理時間等影響因素,採用PEG法對大質粒進行原生質轉化。結果錶明,對數生長前期的菌體(培養3 h),以SMML作滲透壓穩定劑,溶菌酶濃度7 mg/mL,40℃下酶解40 min,原生質體生成量可達5.7×107箇/mL,再生率可達14.1%。在此條件下,採用PEG法可將大質粒pLTV1-ep成功轉化宿主菌,轉化率為0.3 CFU/μg。
연구소운금아포간균원생질체제비여재생적최가조건,위진일보제고원생질체전화솔타하기출。통과매해법대소운금아포간균고사탑극아충공업생산균주(Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki)2671원생질체적제비급재생조건진행료연구,고찰료균체생장상태、용균매농도、처리시간등영향인소,채용PEG법대대질립진행원생질전화。결과표명,대수생장전기적균체(배양3 h),이SMML작삼투압은정제,용균매농도7 mg/mL,40℃하매해40 min,원생질체생성량가체5.7×107개/mL,재생솔가체14.1%。재차조건하,채용PEG법가장대질립pLTV1-ep성공전화숙주균,전화솔위0.3 CFU/μg。