CAJ | 학술논문

以玉米自交系郑58基因组DNA为模板，设计了2对特异性引物，分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）启动子及其全长编码序列，利用In－Fusion技术将两者定向克隆到载体pCAMBIA－1391Z上，并对重组子进行测序验证。结果表明，该PEPC启动子序列与GenBank中的玉米自交系B73的同源性为97．70％，片段长1200 bp；全长编码序列同源性为97．90％，片段长6330 bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体pCAMBIA－1391Z，利用In－Fusion技术将线性载体与之前获得的2个 PCR 片段连接，测序结果与预期序列一致，表明成功构建了pCAMBIA－1391Z－PEPC 植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论，以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C 4型 PEPC基因功能研究和C 3植物遗传转化提供可用的基因序列。
이옥미자교계정58기인조DNA위모판，설계료2대특이성인물，분별PCR확증옥미C4형린산희순식병동산최화매（PEPC）계동자급기전장편마서렬，이용In－Fusion기술장량자정향극륭도재체pCAMBIA－1391Z상，병대중조자진행측서험증。결과표명，해PEPC계동자서렬여GenBank중적옥미자교계B73적동원성위97．70％，편단장1200 bp；전장편마서렬동원성위97．90％，편단장6330 bp。통과HindⅢ화EcoRⅠ매절재체pCAMBIA－1391Z，이용In－Fusion기술장선성재체여지전획득적2개 PCR 편단련접，측서결과여예기서렬일치，표명성공구건료pCAMBIA－1391Z－PEPC 식물표체재체。대극륭화재체구건중존재적문제진행료토론，이기위해류형기인적고효극륭급표체재체적구건제공삼고、위C 4형 PEPC기인공능연구화C 3식물유전전화제공가용적기인서렬。