基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
12期
1650-1654
,共5页
陶冬英%王云%倪晶晶%杨菊林%范任华
陶鼕英%王雲%倪晶晶%楊菊林%範任華
도동영%왕운%예정정%양국림%범임화
脂联素%肝纤维化%肝细胞L02%基质金属蛋白酶-9
脂聯素%肝纖維化%肝細胞L02%基質金屬蛋白酶-9
지련소%간섬유화%간세포L02%기질금속단백매-9
adiponectin%hepatic fibrosis%L02 hepatocytes%matrix metalloproteinases-9
目的 观察重组脂联素对肝细胞系L02基质金属蛋白酶-9表达及活性的影响,探讨脂联素在肝纤维化中的作用.方法 细胞分未转染对照组、转染空载体组、整合了adi-pEGFP-C1的L02细胞3组.体外扩增脂联素adiponectin mRNA全长,通过双酶切、插入及连接等基因克隆方法构建真核表达载体adi-pEGFP-C1.然后通过基因转染方法,将adi-pEGFP-C1转染到肝细胞系L02细胞中.通过G418压力筛选出adi-pEGFP-C1/L02稳定细胞系,用基因、蛋白以及蛋白酶谱等技术检测基质金属蛋白酶MMP-9的基因水平、蛋白水平以及酶的活性水平.结果 adi-pEGFP-C1构建成功,并成功筛选到L02稳定细胞系adi-pEGFP-C1/L02,与空白对照组相比,MMP-9mRNA表达水平上调(P＜0.01),MMP-9蛋白水平和活性均上调(P＜0.05).结论 脂联素通过调节MMP-9的表达及活性可能影响肝纤维化进程.
目的 觀察重組脂聯素對肝細胞繫L02基質金屬蛋白酶-9錶達及活性的影響,探討脂聯素在肝纖維化中的作用.方法 細胞分未轉染對照組、轉染空載體組、整閤瞭adi-pEGFP-C1的L02細胞3組.體外擴增脂聯素adiponectin mRNA全長,通過雙酶切、插入及連接等基因剋隆方法構建真覈錶達載體adi-pEGFP-C1.然後通過基因轉染方法,將adi-pEGFP-C1轉染到肝細胞繫L02細胞中.通過G418壓力篩選齣adi-pEGFP-C1/L02穩定細胞繫,用基因、蛋白以及蛋白酶譜等技術檢測基質金屬蛋白酶MMP-9的基因水平、蛋白水平以及酶的活性水平.結果 adi-pEGFP-C1構建成功,併成功篩選到L02穩定細胞繫adi-pEGFP-C1/L02,與空白對照組相比,MMP-9mRNA錶達水平上調(P＜0.01),MMP-9蛋白水平和活性均上調(P＜0.05).結論 脂聯素通過調節MMP-9的錶達及活性可能影響肝纖維化進程.
목적 관찰중조지련소대간세포계L02기질금속단백매-9표체급활성적영향,탐토지련소재간섬유화중적작용.방법 세포분미전염대조조、전염공재체조、정합료adi-pEGFP-C1적L02세포3조.체외확증지련소adiponectin mRNA전장,통과쌍매절、삽입급련접등기인극륭방법구건진핵표체재체adi-pEGFP-C1.연후통과기인전염방법,장adi-pEGFP-C1전염도간세포계L02세포중.통과G418압력사선출adi-pEGFP-C1/L02은정세포계,용기인、단백이급단백매보등기술검측기질금속단백매MMP-9적기인수평、단백수평이급매적활성수평.결과 adi-pEGFP-C1구건성공,병성공사선도L02은정세포계adi-pEGFP-C1/L02,여공백대조조상비,MMP-9mRNA표체수평상조(P＜0.01),MMP-9단백수평화활성균상조(P＜0.05).결론 지련소통과조절MMP-9적표체급활성가능영향간섬유화진정.
