CAJ | 학술논문

目的:研究不同浓度转化生长因子-β1(TGF-β1)在体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的能力.方法:取SD大鼠四肢骨骨髓,密度梯度离心法分离大鼠BMSCs,以TGF-β1 5 μg/L(低剂量组)、10μg/L(高剂量组)对第3代BMSCs进行体外诱导,未诱导的骨髓间充质干细胞做对照.相差显微镜观察细胞形态,MTS试剂盒检测细胞活性.分化14天后,流式细胞仪分析三组细胞DNA周期;免疫荧光法鉴定心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin,cTnI)、心肌平滑肌肌动蛋白(aactin)和心肌肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)的表达率.结果:三组细胞均呈对数生长趋势,诱导组细胞数量增长较对照组缓慢(P＜0.05),诱导组之间比较,细胞增长无明显差异.分析细胞DNA周期显示:诱导14天后,对照组增殖指数明显高于诱导组(P＜0.05),不同浓度诱导组之间比较,细胞增殖指数无明显差异.免疫荧光法检测结果显示:诱导14天后,诱导组细胞均部分表达cTnI、α-actin及MHC,TGF-β1高剂量组细胞转化率高于低剂量组;对照组均不表达cTnI、α-actin及MHC.结论:10μg/L TGF-β1与5μg/L TGF-β1比较,更有效促进BMSCs体外向心肌样细胞分化,且对细胞增殖活性无明显影响.
목적:연구불동농도전화생장인자-β1(TGF-β1)재체외정향유도대서골수간충질간세포(BMSCs)향심기양세포분화적능력.방법:취SD대서사지골골수,밀도제도리심법분리대서BMSCs,이TGF-β1 5 μg/L(저제량조)、10μg/L(고제량조)대제3대BMSCs진행체외유도,미유도적골수간충질간세포주대조.상차현미경관찰세포형태,MTS시제합검측세포활성.분화14천후,류식세포의분석삼조세포DNA주기;면역형광법감정심기기개단백Ⅰ(cardiac troponin,cTnI)、심기평활기기동단백(aactin)화심기기구단백중련(myosin heavy chain,MHC)적표체솔.결과:삼조세포균정대수생장추세,유도조세포수량증장교대조조완만(P＜0.05),유도조지간비교,세포증장무명현차이.분석세포DNA주기현시:유도14천후,대조조증식지수명현고우유도조(P＜0.05),불동농도유도조지간비교,세포증식지수무명현차이.면역형광법검측결과현시:유도14천후,유도조세포균부분표체cTnI、α-actin급MHC,TGF-β1고제량조세포전화솔고우저제량조;대조조균불표체cTnI、α-actin급MHC.결론:10μg/L TGF-β1여5μg/L TGF-β1비교,경유효촉진BMSCs체외향심기양세포분화,차대세포증식활성무명현영향.