中国乳品工业
中國乳品工業
중국유품공업
CHINA DAIRY INDUSTRY
2014年
11期
13-16
,共4页
RagD%奶牛乳腺上皮细胞%β-酪蛋白%蛋氨酸
RagD%奶牛乳腺上皮細胞%β-酪蛋白%蛋氨痠
RagD%내우유선상피세포%β-락단백%단안산
RagD%bovine mammary epithelial cells%β-casein%methionine
以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究了RagD对细胞中β-酪蛋白(CSN2)的合成及蛋氨酸调节CSN2合成信号通路的影响.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(WB)检测添加蛋氨酸后细胞中CSN2与RagD的表达;对RagD进行过表达和抑制,用qRT-PCR和WB检测细胞中CSN2、mTOR和p-mTOR的表达.结果表明:添加蛋氨酸使细胞中CSN2和RagD的表达显著增加;RagD过表达时,细胞中CSN2与p-mTOR的表达显著增加,mTOR表达变化不显著,此时添加蛋氨酸,细胞中CSN2与p-mTOR的表达继续显著增加;RagD抑制时,细胞中CSN2与p-mTOR的表达显著下降,mTOR表达变化不显著(P＞0.05),此时添加蛋氨酸,不能使细胞中CSN2与p-mTOR的表达恢复.RagD作为信号分子,能接收并传递蛋氨酸信号,使细胞中mTOR磷酸化,正向调节奶牛乳腺上皮细胞中CSN2的表达.
以體外培養的奶牛乳腺上皮細胞為模型,研究瞭RagD對細胞中β-酪蛋白(CSN2)的閤成及蛋氨痠調節CSN2閤成信號通路的影響.採用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白質免疫印跡(WB)檢測添加蛋氨痠後細胞中CSN2與RagD的錶達;對RagD進行過錶達和抑製,用qRT-PCR和WB檢測細胞中CSN2、mTOR和p-mTOR的錶達.結果錶明:添加蛋氨痠使細胞中CSN2和RagD的錶達顯著增加;RagD過錶達時,細胞中CSN2與p-mTOR的錶達顯著增加,mTOR錶達變化不顯著,此時添加蛋氨痠,細胞中CSN2與p-mTOR的錶達繼續顯著增加;RagD抑製時,細胞中CSN2與p-mTOR的錶達顯著下降,mTOR錶達變化不顯著(P＞0.05),此時添加蛋氨痠,不能使細胞中CSN2與p-mTOR的錶達恢複.RagD作為信號分子,能接收併傳遞蛋氨痠信號,使細胞中mTOR燐痠化,正嚮調節奶牛乳腺上皮細胞中CSN2的錶達.
이체외배양적내우유선상피세포위모형,연구료RagD대세포중β-락단백(CSN2)적합성급단안산조절CSN2합성신호통로적영향.채용실시형광정량PCR(qRT-PCR)화단백질면역인적(WB)검측첨가단안산후세포중CSN2여RagD적표체;대RagD진행과표체화억제,용qRT-PCR화WB검측세포중CSN2、mTOR화p-mTOR적표체.결과표명:첨가단안산사세포중CSN2화RagD적표체현저증가;RagD과표체시,세포중CSN2여p-mTOR적표체현저증가,mTOR표체변화불현저,차시첨가단안산,세포중CSN2여p-mTOR적표체계속현저증가;RagD억제시,세포중CSN2여p-mTOR적표체현저하강,mTOR표체변화불현저(P＞0.05),차시첨가단안산,불능사세포중CSN2여p-mTOR적표체회복.RagD작위신호분자,능접수병전체단안산신호,사세포중mTOR린산화,정향조절내우유선상피세포중CSN2적표체.
