暨南大学学报(自然科学与医学版)
暨南大學學報(自然科學與醫學版)
기남대학학보(자연과학여의학판)
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION)
2014年
5期
463-467
,共5页
高绿芬%高雪松%麦浩山%张翼婷%施重任%宋泓%杨一%田雨可
高綠芬%高雪鬆%麥浩山%張翼婷%施重任%宋泓%楊一%田雨可
고록분%고설송%맥호산%장익정%시중임%송홍%양일%전우가
干细胞%子宫内膜间质干细胞%子宫内膜干细胞%子宫内膜%蜕膜组织%分离%定向分化
榦細胞%子宮內膜間質榦細胞%子宮內膜榦細胞%子宮內膜%蛻膜組織%分離%定嚮分化
간세포%자궁내막간질간세포%자궁내막간세포%자궁내막%세막조직%분리%정향분화
stem cells%endometrial stromal stem cells%endometrial stem cells%first-trimester human hecidua%isolatation%differentiation
目的:探讨早孕蜕膜组织分离子宫内膜间质干细胞及子宫内膜间质干细胞向子宫内膜分化的方法.方法:胶原酶Ⅰ法消化早孕人流子宫蜕膜组织,贴壁法分离子宫内膜间质干细胞,传代纯化至第2代,流式细胞仪检测其表面抗原.细胞免疫组织化学法检测角蛋白(CK)、波形蛋白(VIM)的表达.取第2代细胞,接种于24孔培养板爬片.实验分两组:单纯培养基组,细胞因子组即分别加入质量浓度均为10 ng/mL TGF-[3、EGF与PDGF-BB.培养至第6天,采用免疫细胞化学法检测子宫内膜上皮标记物CK18和间质标记物VIM的表达.结果:胶原酶Ⅰ酶消化后贴壁培养法能稳定从人早孕蜕膜组织中分离出子宫内膜间质干细胞;子宫内膜间质干细胞不表达CD34、CD45、CK,强表达CD73、CD90、HLA-Ⅰ;细胞免疫化学法检测干细胞CK阴性,VIM阳性.细胞免疫化学染色提示生长因子组CK阳性,VIM阳性,而对照组CK阴性,VIM阳性.结论:胶原酶法能有效从早孕蜕膜组织中分离出子宫内膜间质干细胞,且子宫内膜间质干细胞能向子宫内膜上皮细胞分化.
目的:探討早孕蛻膜組織分離子宮內膜間質榦細胞及子宮內膜間質榦細胞嚮子宮內膜分化的方法.方法:膠原酶Ⅰ法消化早孕人流子宮蛻膜組織,貼壁法分離子宮內膜間質榦細胞,傳代純化至第2代,流式細胞儀檢測其錶麵抗原.細胞免疫組織化學法檢測角蛋白(CK)、波形蛋白(VIM)的錶達.取第2代細胞,接種于24孔培養闆爬片.實驗分兩組:單純培養基組,細胞因子組即分彆加入質量濃度均為10 ng/mL TGF-[3、EGF與PDGF-BB.培養至第6天,採用免疫細胞化學法檢測子宮內膜上皮標記物CK18和間質標記物VIM的錶達.結果:膠原酶Ⅰ酶消化後貼壁培養法能穩定從人早孕蛻膜組織中分離齣子宮內膜間質榦細胞;子宮內膜間質榦細胞不錶達CD34、CD45、CK,彊錶達CD73、CD90、HLA-Ⅰ;細胞免疫化學法檢測榦細胞CK陰性,VIM暘性.細胞免疫化學染色提示生長因子組CK暘性,VIM暘性,而對照組CK陰性,VIM暘性.結論:膠原酶法能有效從早孕蛻膜組織中分離齣子宮內膜間質榦細胞,且子宮內膜間質榦細胞能嚮子宮內膜上皮細胞分化.
목적:탐토조잉세막조직분리자궁내막간질간세포급자궁내막간질간세포향자궁내막분화적방법.방법:효원매Ⅰ법소화조잉인류자궁세막조직,첩벽법분리자궁내막간질간세포,전대순화지제2대,류식세포의검측기표면항원.세포면역조직화학법검측각단백(CK)、파형단백(VIM)적표체.취제2대세포,접충우24공배양판파편.실험분량조:단순배양기조,세포인자조즉분별가입질량농도균위10 ng/mL TGF-[3、EGF여PDGF-BB.배양지제6천,채용면역세포화학법검측자궁내막상피표기물CK18화간질표기물VIM적표체.결과:효원매Ⅰ매소화후첩벽배양법능은정종인조잉세막조직중분리출자궁내막간질간세포;자궁내막간질간세포불표체CD34、CD45、CK,강표체CD73、CD90、HLA-Ⅰ;세포면역화학법검측간세포CK음성,VIM양성.세포면역화학염색제시생장인자조CK양성,VIM양성,이대조조CK음성,VIM양성.결론:효원매법능유효종조잉세막조직중분리출자궁내막간질간세포,차자궁내막간질간세포능향자궁내막상피세포분화.