中国草地学报
中國草地學報
중국초지학보
CHINESE JOURNAL OF GRASSLAND
2014年
6期
46-52
,共7页
包蕊%胡延萍%王莉%旭荣花%李毅
包蕊%鬍延萍%王莉%旭榮花%李毅
포예%호연평%왕리%욱영화%리의
华扁穗草%ISSR-PCR%反应体系%正交试验设计%引物筛选
華扁穗草%ISSR-PCR%反應體繫%正交試驗設計%引物篩選
화편수초%ISSR-PCR%반응체계%정교시험설계%인물사선
Blysmus sinocompressus%ISSR-PCR%Reaction system%Orthogonal design%Primer screening
利用正交试验设计方法,对影响华扁穗草ISSR-PCR反应中Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和DNA模板等5个因素进行优化筛选,以期建立最佳反应条件.同时,筛选扩增条带清晰稳定的ISSR引物,经退火温度试验得到各个引物的最佳退火温度.结果表明:华扁穗草20μl ISSR-PCR最佳反应体系包括1.80 mmol/L Mg2+、0.80 U Taq DNA聚合酶、0.100 mmol/L dNTP、0.6umol/L引物和20ng DNA模板;筛选出扩增条带清晰稳定的10条引物.体系验证和引物筛选试验表明,其在华扁穗草不同个体中能够扩增出条带清晰、稳定性好的条带,可用于后续华扁穗草遗传多样性分析,为华扁穗草野生资源保护和优良牧草种质资源选育提供理论依据.
利用正交試驗設計方法,對影響華扁穗草ISSR-PCR反應中Mg2+、Taq DNA聚閤酶、dNTP、引物和DNA模闆等5箇因素進行優化篩選,以期建立最佳反應條件.同時,篩選擴增條帶清晰穩定的ISSR引物,經退火溫度試驗得到各箇引物的最佳退火溫度.結果錶明:華扁穗草20μl ISSR-PCR最佳反應體繫包括1.80 mmol/L Mg2+、0.80 U Taq DNA聚閤酶、0.100 mmol/L dNTP、0.6umol/L引物和20ng DNA模闆;篩選齣擴增條帶清晰穩定的10條引物.體繫驗證和引物篩選試驗錶明,其在華扁穗草不同箇體中能夠擴增齣條帶清晰、穩定性好的條帶,可用于後續華扁穗草遺傳多樣性分析,為華扁穗草野生資源保護和優良牧草種質資源選育提供理論依據.
이용정교시험설계방법,대영향화편수초ISSR-PCR반응중Mg2+、Taq DNA취합매、dNTP、인물화DNA모판등5개인소진행우화사선,이기건립최가반응조건.동시,사선확증조대청석은정적ISSR인물,경퇴화온도시험득도각개인물적최가퇴화온도.결과표명:화편수초20μl ISSR-PCR최가반응체계포괄1.80 mmol/L Mg2+、0.80 U Taq DNA취합매、0.100 mmol/L dNTP、0.6umol/L인물화20ng DNA모판;사선출확증조대청석은정적10조인물.체계험증화인물사선시험표명,기재화편수초불동개체중능구확증출조대청석、은정성호적조대,가용우후속화편수초유전다양성분석,위화편수초야생자원보호화우량목초충질자원선육제공이론의거.
