热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
10期
1984-1991
,共8页
匡华琴%刘生财%陈裕坤%赖钟雄
劻華琴%劉生財%陳裕坤%賴鐘雄
광화금%류생재%진유곤%뢰종웅
马银花%愈伤组织%WUS%启动子%基因克隆%生物信息学分析%荧光定量PCR
馬銀花%愈傷組織%WUS%啟動子%基因剋隆%生物信息學分析%熒光定量PCR
마은화%유상조직%WUS%계동자%기인극륭%생물신식학분석%형광정량PCR
Rhododendron ovatum%Callus%WUSCHEL%Promoter%Cloning%Bioinformatics%qPCR
WUSCHEL(WUS)基因是植物干细胞的标志基因.采用同源克隆法结合RACE技术从马银花愈伤组织中克隆得到RoWUScDNA全长序列,采用染色体步移法克隆得到该基因的启动子序列,登录号分别为KF365488、KF861578.马银花RoWUS cDNA全长1 123bp,编码302个氨基酸;DNA序列2001 bp,包含2个内含子和3个外显子;启动子序列3 122 bp.生物信息学分析表明:RoWUS亚细胞定位于细胞核,是不稳定的亲水蛋白,无信号肽,具有跨膜结构,包含homeodomain功能位点.系统进化树分析结果表明:RoWUS单独形成一个分支,与葡萄、大豆和苜蓿的亲缘关系最近.对RoWUS的启动子进行分析表明,该启动子除了含有丰富的TATA-box和CAAT-box等基本元件以外,还含有多个光响应元件、逆境胁迫响应元件、激素应答元件和其他功能元件.qPCR结果表明:RoWUS基因在马银花愈伤组织不同生长时期中呈先上升后下降的趋势,在第5个继代周期时表达量最高.外源赤霉素和脱落酸浓度为15 mg/L时表达量最高,说明RoWUS基因在该浓度时对赤霉素和脱落酸的响应最强.
WUSCHEL(WUS)基因是植物榦細胞的標誌基因.採用同源剋隆法結閤RACE技術從馬銀花愈傷組織中剋隆得到RoWUScDNA全長序列,採用染色體步移法剋隆得到該基因的啟動子序列,登錄號分彆為KF365488、KF861578.馬銀花RoWUS cDNA全長1 123bp,編碼302箇氨基痠;DNA序列2001 bp,包含2箇內含子和3箇外顯子;啟動子序列3 122 bp.生物信息學分析錶明:RoWUS亞細胞定位于細胞覈,是不穩定的親水蛋白,無信號肽,具有跨膜結構,包含homeodomain功能位點.繫統進化樹分析結果錶明:RoWUS單獨形成一箇分支,與葡萄、大豆和苜蓿的親緣關繫最近.對RoWUS的啟動子進行分析錶明,該啟動子除瞭含有豐富的TATA-box和CAAT-box等基本元件以外,還含有多箇光響應元件、逆境脅迫響應元件、激素應答元件和其他功能元件.qPCR結果錶明:RoWUS基因在馬銀花愈傷組織不同生長時期中呈先上升後下降的趨勢,在第5箇繼代週期時錶達量最高.外源赤黴素和脫落痠濃度為15 mg/L時錶達量最高,說明RoWUS基因在該濃度時對赤黴素和脫落痠的響應最彊.
WUSCHEL(WUS)기인시식물간세포적표지기인.채용동원극륭법결합RACE기술종마은화유상조직중극륭득도RoWUScDNA전장서렬,채용염색체보이법극륭득도해기인적계동자서렬,등록호분별위KF365488、KF861578.마은화RoWUS cDNA전장1 123bp,편마302개안기산;DNA서렬2001 bp,포함2개내함자화3개외현자;계동자서렬3 122 bp.생물신식학분석표명:RoWUS아세포정위우세포핵,시불은정적친수단백,무신호태,구유과막결구,포함homeodomain공능위점.계통진화수분석결과표명:RoWUS단독형성일개분지,여포도、대두화목숙적친연관계최근.대RoWUS적계동자진행분석표명,해계동자제료함유봉부적TATA-box화CAAT-box등기본원건이외,환함유다개광향응원건、역경협박향응원건、격소응답원건화기타공능원건.qPCR결과표명:RoWUS기인재마은화유상조직불동생장시기중정선상승후하강적추세,재제5개계대주기시표체량최고.외원적매소화탈락산농도위15 mg/L시표체량최고,설명RoWUS기인재해농도시대적매소화탈락산적향응최강.
